YT031型生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售YT031型生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)现货供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：YT031型生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)现货供应
编号：YT031
规格：10次
产地：国产|进口
英文名：Biotin Random Prime DNA Labeling Kit)
本试剂盒是一种通过随机引物标记反应产生生物素标记DNA探针的试剂盒。本试剂盒标记的生物素DNA探针可以用于常规的Northern、Southern、colony或plaque hybridization、dot或slot blot、原位杂交等。

在Klenow酶(Klenow fragment,3"-5"exo-)催化下，通过随机引物标记反应(random prime labeling)可以把生物素标记的Biotin-11-dUTP掺入到新合成的DNA探针中，这样就可以产生生物素标记的DNA探针。在随机引物标记反应过程中，一些标记好的DNA探针可以被Klenow酶从模板DNA链上驱赶下来。这样在模板量较少的情况下，通过随机引物标记反应，ZH可以产生比模板DNA量更多的生物素标记DNA探针，可多达1-15倍左右。

本试剂盒可以用于多种DNA模板的标记，包括DNA*(代"片")段、线性化的质粒或cosmid、超螺旋DNA等。用于本试剂盒的模板DNA*(代"片")段应不小于100bp，小于100bp的DNA模板可以使用百奥莱博的生物素3"末端DNA标记试剂盒(YT030)进行DNA探针标记。

用于本试剂盒的模板DNA的量应不少于10ng，推荐的模板用量为100ng-1μg。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control DNA，可以用作检测生物素DNA探针标记效率的对照。生物素标记DNA可以使用百奥莱博的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(YT032)或其它适当试剂盒进行检测。本试剂盒可以用于10个标记反应。

试剂盒组分：

 

Random Primer in Buffer(5X)	105μl
Klenow Fragment	11μl
Biotin-Labeling Mix	50μl
Ultrapure Water	1ml
Biotin-Control DNA(3ng/μl)	50μl
探针标记终止液	100μl

储存条件：-20℃。

使用说明：
1. 在一离心管或PCR管内加入100ng-1μg DNA模板，再加入适量试剂盒提供的Ultrapure Water，至总体积为34μl。(通常100-300ng DNA模板已经足够用于一次标记反应)
2. 加入10μl Random Primer in Buffer (5X)，混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
3. 沸水浴加热5分钟，或在PCR仪上100℃加热5分钟(如果不能设置100℃，99℃加热5分钟也完全可以)。
4. 立即放置到预先准备好的冰水浴中至少2-3分钟。
5. 加入5μl Biotin-Labeling Mix。
6. 加入1μl Klenow Fragment，混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
7. 37℃孵育1小时或过夜(不宜超过20小时)。37℃孵育过夜可以显著增加生物素标记DNA的产量，因此推荐孵育过夜(12-20)小时。
8. 加入3μl探针标记终止液，混匀，终止标记反应。至此标记反应已经全部完成，标记好的DNA可以-20℃保存。
9. 此时探针可以直接用于探针标记效率的检测及Southern、Northern等后续操作。
10. 整个探针标记反应的流程参见下表：

100ng-1μgDNA模板	xμl
Ultrapure Water	(34-x)μl
Random Primer in Buffer (5X)	10μl
100℃ 5分钟，立即冰浴冷却
Biotin-Labeling Mix	5μl
Klenow Fragment	1μl
总体积	50μl
37℃孵育过夜
探针标记终止液	3μl
-20℃保存
此时可用于标记效率的检测及Southern、Northern等后续检测

11. 探针标记效率的检测：可以对标记好的探针进行适当梯度稀释后，使用百奥莱博的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(YT032)或其它适当的方法进行检测。通常探针的标记效率可以参考下表：

模板DNA量	生物素标记DNA产量
—	孵育1小时	孵育20小时
10ng	80ng	900ng
30ng	150ng	1350ng
100ng	350ng	1650ng
300ng	750ng	2200ng
1000ng	1300ng	2600ng
3000ng	1600ng	2600ng

注意：具体的探针标记效率还和模板DNA的长度、纯度等因素有关，上表的数值仅供参考。
12. 使用本试剂盒所获得的生物素标记DNA的长度通常在数百bp左右。具体的长度因模板的长度而有所不同。例如模板DNA的长度为1kb，则生物素标记DNA产物的长度通常为100-1000bp，平均长度约为300bp左右。

除YT031型生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)现货供应外，我公司正在打折促销以下产品：
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·Hoechst 33258染色液
编号：YT893
英文名称：Hoechst 33258 Staining Solution
规格：10ml|50ml
本Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。

Hoechst 33258的ZD激发波长为346nm，ZD发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，ZD激发波长为352nm，ZD发射波长为461nm。

CAS：23491-45-4
分子式：C25H24N6O·3HCl
分子量：533.88

注意事项：
1. 本Hoechst 33258 染色液的浓度经过百奥莱博的优化，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的Hoechst 33258，请选购百奥莱博的Hoechst 33258(YT892)。如需染色活细胞或培养的组织，请选购百奥莱博的Hoechst 33342活细胞染色液(100X) (YT896)，效果更佳。
2. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
3. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(YT097)可以向百奥莱博订购。

储存条件：-20℃避光，有效期一年。


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·兔抗CD133抗体
编号：YT694
英文名称：CD133 Rabbit Polyclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于兔的抗CD133的多克隆抗体
宿主：兔
克隆性：多克隆抗体
用途：WB,FCM,IHC,ICC, IF
交叉反应性：人
分子量：100KDa
推荐稀释比例：WB(1:1000),IF(1:200),IHC(1:200),ICC(1:200),FCM(1:100-1:200)
 

About this Antibody
Name	CD133 Rabbit Polyclonal Antibody
Category	Polyclonal antibody(pAb); Primary antibody
Isotype	IgG
Purification	Peptide affinity purified
About the Immunogen
Immunogen	This antibody is produced by immunizing rabbits with the recombinant protein of human CD133.
Gene ID	8842
SwissProt	O43490
Synonyms	Prominin-1; Prominin1; Prominin 1; Antigen AC133; Prominin-like protein 1; CD133; PROM1; PROML1; MSTP061
Category	Immunology and Inflammation
Background	CD133 is a glycoprotein also known in humans and rodents as Prominin 1 (PROM1). It is the founding member of pentaspan transmembrane glycoproteins (5-transmembrane, 5-TM), which specifically localizes to cellular protrusions. CD133 is expressed in hematopoietic stem cells, endothelial progenitor cells, glioblastomas, neuronal and glial stem cells and some other cell types. CD133 is recognized as a stem cell marker for normal and cancerous tissues.

注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得ZJ的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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