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北京百奥莱博专业生产销售北京DNA消化试剂盒(DNase I)厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京DNA消化试剂盒(DNase I)厂家
编号:ALH044
规格:1500U
品Pai:百奥莱博
英文名:DNA digestion kit
Dnase I中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5"端为磷酸基团,3"端为羟基。DNase I活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
经过本试剂盒独特的反应液消化后不需要繁琐的苯酚/氯*(代"仿")抽提灭活,可直接用于反转录反应,使用起来非常快速方便。
活性单位:37℃ 10分钟内,将能够完全降解1μg pBR322 质粒DNA 所需的酶量定义为1 个活性单位。
来源:大肠杆菌表达的31kd 重组蛋白。
酶贮存缓冲液:50 mM Tris-HCl (pH7.5),10 mM CaCl2,50% (v/v)glycerol。
10×DNase Buffer:100 mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃),25 mM MgCl2,1 mM CaCl2。
纯度:不含其它DNA 内切酶和外切酶,不含RNA 酶。
适用范围:制备不含DNA的RNA样品; RT-PCR反应前RNA 样品中去除基因组DNA 等可能的DNA污染;体外T7,T3,SP6等RNAPolymerases催化的RNA 转录后去除DNA模板;DNase I footprinting 研究DNA-蛋白质相互作用;缺口平移(nick translatioin);产生DNA 随机片断文库;细胞凋亡TUNEL 检测中部分剪切基因组DNA 作为阳性对照。
反应体系与条件:
1.在RNAse free 管里面加入以下成分
RNA:<3μg (<8μl)
10×DNase Buffer:1μl
DNase I:1μl
RNase free water:Up to 10μl
2. 37℃孵育30分钟。
3. 加1μl EDTA Stopper。
4. 65℃孵育10 分钟,灭活DNase I。
4. 取适量或者全部10μl 的处理过的RNA 直接用于反转录。
注意事项:
每μl DNase I 最多处理不超过3μg RNA。如果需要RNA 较多,需要根据RNA 的处理量按比例放大DNase I、10×DNase Buffer 使用量和反应体积。如果处理后需要得到纯净RNA,可以使用RNA 清洁纯化试剂盒在第2 步后(37℃孵育30 分钟后)直接清洁纯化(不需要加EDTA Stopper 和65℃孵育10分钟的步骤了)。
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·粪便基因组DNA提取试剂盒
编号:ALH170
英文名称:Fecal genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于快速提取各种粪便DNA。常规的DNA纯化方式并不能有效地去除粪便中存在的大量YZ因子而导致下游实验的失败,如PCR不能扩增出所需片段。该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统,能有效去除动物粪便中各种影响下游实验(如PCR)的YZ因子,并能GX地回收粪便中的基因组DNA。动物粪便样品经特殊缓冲液ASL重悬后,70℃处理5分钟裂解细菌;离心去除不溶解的杂质,蛋白酶K消化进一步去除蛋白和杂质;然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, YZ物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除, ZH低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(50次):
缓冲液ASL—————————0.5ml
杂质清除剂AB———————50ml
结合液CB—————————20ml
YZ物去除液IR——————25ml
漂洗液WB —————————25ml
洗脱缓冲液EB ———————20ml
蛋白酶K——————————20mg
吸附柱AC —————————50个
收集管(2ml)————————50个
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在40分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
3. 结合液CB 和YZ物去除液IR 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在-20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
5. PCR 可能被过量的DNA(一般大于1μg)YZ,使用最小用量的洗脱DNA(适当稀释)反而可以得到更好的扩增。一般加入的洗脱DNA 体积不要超过总PCR反应体积的10%。我们建议在PCR反应体系中加入终浓度0.1 μg/μl的BSA(牛血清白蛋白)有助于得到ZJ扩增效果。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京DNA消化试剂盒(DNase I)厂家关键词:DNA消化试剂盒(DNase I),DNASE I
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北京DNA消化试剂盒(DNase I)厂家关键词:DNA消化试剂盒(DNase I),DNASE I
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温馨提示:不可用于临床ZL。