特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖ALH355型一管式定点突变试剂盒北京厂家现货在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:ALH355型一管式定点突变试剂盒北京厂家现货
产地:国产|进口
编号:ALH355
英文名:One Tube Site-specific Mutagenesis Kit
品Pai:百奥莱博
本试剂盒是基于PCR原理向目的DNA*(代"片")段(一般为质粒)中引入碱基的点突变,多个邻近密码子的突变,单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)等。一般宿主菌培养扩增的质粒DNA是甲基化的,PCR扩增新合成的DNA是非甲基化的。首先以待突变的甲基化质粒为模板,利用超快高保真的SuperPfu聚合酶实现突变质粒的合成(非甲基化,包含突变点,且有两个缺刻点nick点),再利用Dpn I酶选择性降解甲基化的模板质粒 ,剩下的新合成非甲基化的突变质粒转入大肠杆菌后,质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复,得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。一般可以产生大于90%的突变效率。本试剂盒适用于<12kb甲基化质粒中核苷酸的突变。
试剂盒组分(10次):
SuperPfu DNA polymerase——————5μl
10×SuperPfu Buffer————————100μl
Dpn I——————-——————-——5μl
10mM dNTP Mixture-——————-——25μl
试剂盒特点:
1、简单,一个PCR管中完成所有操作,速度最快。
2、采用部分重叠引物设计,使PCR呈指数扩增,扩增产物凝胶电泳可见增加成功率。
3、效率高,使用Dpn I去除非突变模板,突变效率高达90%;不需要使用特殊感受态细胞降解非突变质粒。
4、采用分子进化改造的SuperPfu可以提供4倍-6倍于pfu的扩增速率提高和3倍于pfu的超高保真性。
储存条件:-20℃,有效期一年。
本品别名:一管式定点突变试剂盒|一管式突变试剂盒
ALH355型一管式定点突变试剂盒北京厂家现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
DN0101 小量全血基因组DNA快速提取试剂盒(溶液型)
N-羟基硫代琥珀酰亚胺 3-Bromopropylamine hydrobromide 106627-54-7
ARB10238 人ω干扰素(IFN-ω)Elisa分析 Human interferon ω,ifn-ω ELISA KIT
PY02-102 胰酪胨大豆肉汤培养基 250克
盐酸环丙沙星 Thiosalicylic acid 93107-08-5
PY04-057 氯霉素 1g/支×10支 根据要求适量添加 YJ剂
BL1342 PH值标准液(PH4.01)
ARB10500 人白色念珠菌(C.AlbIcAns)尿液中含量检测 Human candida albicans,c.albicans ELISA KIT
NF-263 冻干统一参考血清
BTN131021 链霉亲和素 Streptavidin
L-亮氨醇 Phenidone 7533-40-6
BTN131076 磷酸蛋白染色试剂盒 Staining Kit for Phosphate Protein
25988-63-0 Poly-L-Lysine 多聚-L-赖氨酸(7-15万)
F030630 FITC标记兔抗人IgG抗体 Rabbit Anti-Human IgG*FITC
PY02-218 叠氮钠葡萄糖肉汤基础 250克
ARB11309 人促卵泡素(FSH)检测服务 Human follicle-stimulating hormone,fsh ELISA KIT
594-43-4 甲基磺酸乙酯(EMS) Ethyl methyl sulfonate
ARB11672 人维生素D结合蛋白(DBP)酶标法分析 Human vitamin d-binding protein,dbp ELISA KIT
ARB14017 绵羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测服务 Sheep insulin-like growth factor-i,igf-i ELISA KIT
F030813 BIOTIN标记兔抗小鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Mouse IgG*BIOTIN
ALH355型一管式定点突变试剂盒北京厂家现货关键词:一管式定点突变试剂盒,一管式突变试剂盒
·细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)
编号:ALH158
英文名称:Cells/Tissue Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
规格:20次|50次
本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder,通过选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder,ZD限度的减少了基因组DNA对凋亡DNA ladder的观察干扰,因此显著的提高了检测敏感度,反应可在微量离心管进行,2.5小时完成,快速方便;无需有机抽提,检测灵敏度极高,可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5~10×10^5 个,但投入的细胞量可在1×10^5~5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1~2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比,整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差往往造成难以准确取材,可能显著影响实验结果。但只要组织确实发生凋亡,有经验的用户也可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder
试剂盒组份(50次):
Extraction buffer ———10ml
10%SDS—————————1ml
Enzyme A————————1ml
Enzyme B————————1ml
Precipitant ——————7ml
为保持活性方便运输,Enzyme B 客户收到时为冻干粉,收到后加500μl 灭菌水(25 次)或者1ml 灭菌水(50次)溶解后-20℃保存。Enzyme A 和Enzyme B 为酶溶液,应该避免反复冻融降低活性,如果要分多次使用,按照每次使用量分装后-20℃保存。
注意事项
1. 溴化乙锭染色过度将降低DNA条带检测灵敏度,可用水冲洗凝胶10~30分钟。如冲洗过头可再用溴化乙锭复染。可用更灵敏的DNA染色剂SYBR Green。也可进行丙烯酰胺DNA凝胶电泳和DNA银染。
2. 对细胞进行干预处理后,凋亡可能仅在某一时间点或某一干预强度下最为明显。需要进行预试验确定ZJ干预时间或强度。此时也可用凋亡小体/hoeschst染色试剂盒(ALH160)快速染色凋亡小体观察。
3. 推荐起始细胞量为5~10×10^5 个,但投入的细胞量可在1×10^5~5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1~2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。六孔板的一个孔相当于一个35 mm培养皿长满后可得到1~10×10^5 个细胞,如果细胞凋亡发生率为10%,经过处理可得到约1~10×10^4个凋亡细胞,应该足以获得清晰的凋亡DNA ladder。反之如果不能从>3×10^6个细胞获得清晰的凋亡DNA ladder,表明其中凋亡细胞少于1%。此时增加细胞用量也难已奏效。
4. 从组织块提取凋亡DNA ladder。取10~20 mg组织块放入小玻璃匀浆器,加100~200μl Extraction buffer,上下手动匀浆15~20次。取出匀浆液,冰上5~10 min。振荡10秒。4500 rpm 10分钟收集上清液并转移到新1.5ml离心管,执行提取步骤3。另外一种方法是将30~50mg组织剪碎后在PBS里面匀浆,制成细胞悬液,离心收集细胞后接步骤2继续执行提取。
5. 采用高质量琼脂糖,使用宽度较小和厚度较窄的样品梳子,制作较薄的琼脂糖凝胶(厚度约2~4 mm);用较低的电压进行慢速电泳,将显著增加凋亡DNA条带检测灵敏度。电泳距离不要太长,否则将使小的凋亡DNA条带弥散而降低分辨率。
ALH355型一管式定点突变试剂盒北京厂家现货关键词:一管式定点突变试剂盒,一管式突变试剂盒
·一步法耐热RT-PCR试剂盒
编号:ALH272
英文名称:One step reverse transcription heat-resistant PCR Kit
规格:50μl×50次|50μl×100次
本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的,使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂,避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasinYZ剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录,大大提高了复杂二级结构,GC含量丰富模板反转录效率,产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。
试剂盒组分(50次):
2×RT-PCR Mix——————————625μl
Enzyme Mix-———————————25μl
耐热RTase————————————25μl
RNase free H2O-—————————1.5ml
适用范围:适用于高拷贝、低拷贝基因检测;适用于高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
3. 不同的片段,所需ZJRNA模板用量不同,过多的RNA会YZ反应,建议根据反应调整模板用量。
4. 不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。
储存条件:-20℃,有效期半年。
·组织细胞基因组DNA提取试剂盒
编号:ALH125
英文名称:Cells/Tissue genomic DNA extraction kit
规格:50次|100次|200次
本试剂盒用于快速的从动植物细胞/组织中提取基因组DNA。样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液,首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA,接着加入RNase A去除RNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,ZH纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
试剂盒组份(200次):
RNase A(10mg/ml)——————400μl
细胞核裂解液————————120ml
蛋白沉淀液—————————40ml
DNA溶解液—————————30ml
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂。
2.快速,简捷,组织样品操作整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定,产量高(比离心柱型的产量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70%乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织)、0.5M EDTA和蛋白酶K(用于鼠尾)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型,可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞量,请联系我们索取其它处理量的操作手册。
储存条件:室温,有效期12个月。
我公司正在优惠促销克隆与表达等系列产品,期待您的咨询选购ALH355型一管式定点突变试剂盒北京厂家现货。
温馨提示:不可用于临床ZL。