中文名称:核酸外切酶 I
英文名称:Exonuclease I
规格:750U
运输及保存:低温运输,-20℃保存,有效期半年
产品及特点
Exonuclease I(核酸外切酶 I)是单链特异性3’→5’核酸外切酶,从ssDNA
的3’-OH末端分解生成5’-单核苷酸。本酶对单链DNA的特异性非常高,不分解
双链DNA及RNA。可通过80℃、15分钟的热处理使之失活,其反应示意图如下:
此产品特点是:
1. PCR反应后残存Primer的分解, 对PCR产物进行测序时,如果在反应体系中残
存Primer 和dNTP,测序反应则不能正常进行。使用Exonuclease I可以解多余
的Primer;同时使用SAP(CAT#:120403)可降解多余的dNTP,之后不需
要对 PCR 产物进行精制,立即可以进行测序反应。
2. 在反应液中去除ssDNA fragment。
核酸外切酶 I活性单位定义
以热变性的小牛胸腺DNA为底物,在37℃、pH9.5的条件下,30分钟内产生
10 nmol的酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
纯度
1. 25 U的本酶和1 μg的λDNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应16小
时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2. 25 U的本酶和1 μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA 在37℃、pH7.5
的条件下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3. 25 U的本酶和1 μg的M13 mp18 ssDNA在37℃、pH7.5的条件下反应16小
时,DNA的电泳谱带不发生变化。
4. 25 U的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应16小时,
RNA的电泳谱带不发生变化。