腺病毒包装/腺病毒载体/Adenovirus
腺病毒介绍:
腺病毒(Adenovirus,ADV)是一种非整合型DNA病毒,直径在70~90nm,病毒颗粒有252个壳粒呈二十面体排列组成。
腺病毒(ADV)基因组是线状双链DNA,两端各有100bp的反向重复序列,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。
根据DNA复制周期的不同,编码区分为早期基因区和晚期基因区:
前者又细分为E1~E4四个区,主要负责编码调节蛋白;而后者分为L1~L5五个区,负责编码结构蛋白。
腺病毒基因组中早期表达的调节蛋白可以调控晚期基因的表达,其中ZX表达的是E1区基因,它所表达的蛋白(包括E2产物) 是腺病毒基因组复制、病毒包装和其他蛋白表达所必需的(图1)。
腺病毒感染过程剧烈,适于在短时间内进行基因高表达实验。
图1 腺病毒作用机制
现已知有51种人腺病毒,根据组织嗜性不同被分成ABCDEF六个不同亚群,其中C亚群的第2和第5血清型最常被用于构建腺病毒载体(表1)。
表1 人类腺病毒血清型分类
分组 | 血清型 |
A | 12,18,31 |
B | 3,7,11,14,16,21,34,35,50 |
C | 1,2,5,6 |
D | 8-10,13,15,17,19,20,22-30,32,33,36-39,42-49,51 |
E | 4 |
F | 40,41 |
腺病毒与慢病毒(LV)、腺相关病毒(AAV)、逆转录病毒(RV)载体相比,具有宿主范围广,免疫原性强,基因容量大,不与基因组整合,瞬间表达等特点,目前较为成熟的载体系统有非复制型(如AdMax)和复制型(又叫溶瘤腺病毒)两种。腺病毒适于在短时间内进行基因高表达的实验。
和元上海提供腺病毒包装服务,该服务的生产和质控采取了国际学术界公认的标准流程,采用二质粒系统在293T细胞中进行包装。所获得的病毒颗粒经过超速梯度离心和过滤,并通过壳蛋白免疫法进行滴度测定。一般情况下腺病毒的滴度在10^10~10^11pfu/ml,完全可以满足各类实验的使用要求。
病毒相关技术服务:
病毒包装服务 腺相关病毒包装 慢病毒包装 腺病毒包装 逆转录病毒包装
资料下载:
腺病毒.pdf
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