质粒和载体的区分!百欧博伟生物
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什么是质粒?
质粒(Plasmid)是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的质粒虽然都是环状构型,它存在于许多细菌以及酵母菌等生物(多为原核生物)中,乃至于植物的线粒体等胞器中。
什么是载体?
载体即要把一个有用的基因(目的基因——研究或应用基因)通过基因工程手段送到生物细胞(受体细胞),需要运载工具(交通工具)携带外源基因进入受体细胞,这种运载工具就叫做载体(vector)。细菌或病毒质粒是重组DNA技术中常用的载体。
⒈载体的分类
按功能分成:
(1)克隆载体都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增。它是用来克隆和扩增DNApian段(基因)的载体。
(2)表达载体具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs等)还具有转录/翻译所必需的DNA顺序的载体。
按进入受体细胞类型分:
(1)原核载体
(2)真核载体
(3)穿梭载体(sbuttlevector)
⒉载体的特点
(1)都能独立自主的复制:载体DNA分子中有一段不影响它们扩增的非必需区域,如MCS,插在其中的外源DNApian段,能被动的跟着载体一起复制/扩增,就像载体的正常成分一样。
(2)都能便利的加以检测:如载体的药物抗性基因,多是抗生素抗性基因,将受体细胞放在含有该抗生素培养板上培养生长时,只有携带这些抗性基因的载体分子的受体细胞才能存活。
(3)都能容易进入宿主细胞中去,也易从宿主细胞中分离纯化出来。
质粒可以说是一个统称,载体是质粒改造过用来运载的工具!!
⒊选用质粒做载体的要求
以zuichangyong的为例
(1)选分子量小的质粒,即小载体(1-1.5kb)→不易损坏,在细菌里面拷贝数也多(也有大载体);
(2)一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束,一般10个以上的拷贝,而严谨型质粒<10个。
(3)必需具备一个以上的酶切位点,有选择的余地;
(4)必需有易检测的标记,多是抗生素的抗性基因,不特指多位Ampr。
无论选用哪种载体,首先都要获得载体分子,然后采用适当的限制酶将载体DNA进行切割,获得分子,以便于与目的基因片段进行连接。
北京百欧博伟生物技术有限公司(biobw)是北京的一家专业于生物技术的研究与广泛运用及推广的高科技公司,位于北京企业林立的丰台区造甲街,生物技术推广及运用早于2011年开始,成立公司于2013年一月。本公司主要提供色谱耗材、色谱仪器、固相萃取装置、化学试剂、样品瓶、氘灯、标准品、微生物技术、菌种保藏服务以及ATCC产品代理等产品及服务。ZG微生物菌种查询网