一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次图片公司的产品目前有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
柱式DNA提取系列产品
2 柱式RNA提取系列(包括动物,血液,植物,细菌RNA提取)
3 5分钟超快DNA电泳液
4 一步式质粒DNA提取系列产品
5 “绿如蓝”DNA染料
6 固相RNase清除剂
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次图片的详细介绍:
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次图片操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次图片实验步骤:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
PVR Protein Human 重组人 CD155 / PVR 蛋白 (His 标签)
ENG Protein Human 重组人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白 (His 标签)
PRMT6 Protein Human 重组人 PRMT6 / HRMT1L6 蛋白 (His & FLAG 标签)
TNFRSF10D Protein Human 重组人 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 标签)
PPIB Protein Human 重组人 Cyclophilin B / PPIB / CYPB 蛋白 (His 标签)
DLL1 Protein Human 重组人 DLL1 / Delta-1 蛋白 (His 标签)
MMP8 Protein Human 重组人 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 标签)
IL17RA Protein Human 重组人 IL17RA / CD217 蛋白 (His 标签)
AGRP Protein Human 重组人 AgRP / AGRP 蛋白 (His 标签)
CST7 Protein Human 重组人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 (His 标签)
IL1R2 Protein Human 重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 标签)
CD97 Protein Human 重组人 CD97 蛋白 (His 标签)
CD1D Protein Human 重组人 CD1D / R3G1 蛋白 (His 标签)
interactions in smooth muscle and nonmuscle cells (could act as a bridge between myosin and actin filaments). Stimulates actin binding of tropomyosin which increases the stabilization of actin filament structure. In muscle tissues, inhibits the actomyosin ATPase by binding to F-actin. This inhibition is attenuated by calcium-calmodulin and is potentiated by tropomyosin. Interacts with actin, myosin, two molecules of tropomyosin and with calmodulin. Also play an essential role during cellular mitosis and receptor capping. Involved in Schwann cell migration during peripheral nerve regeneration.
Subcellular Location : Cytoplasm, cytoskeleton. Cytoplasm, myofibril. Note=On thin filaments in smooth muscle and on stress fibers in fibroblasts (nonmuscle).
Tissue Specificity : High-molecular-weight caldesmon (isoform 1) is predominantly expressed in smooth muscles, whereas low-molecular-weight caldesmon (isoforms 2, 3, 4 and 5) are widely distributed in non-muscle tissues and cells. Not expressed in skeletal muscle or heart.
Post-translational modifications : In non-muscle cells, phosphorylation by CDK1 during mitosis causes caldesmon to dissociate from microfilaments. Phosphorylation reduces caldesmon binding to actin, myosin, and calmodulin as well as its inhibition of actomyosin ATPase activity. Phosphorylation also occurs in both quiescent and dividing smooth muscle cells with similar effects on the interaction with actin and calmodulin and on microfilaments reorganization. CDK1-mediated phosphorylation promotes Schwann cell migration during peripheral nerve regeneration (By similarity).
Similarity : Belongs to the caldesmon family.
Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q05682.3
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次图片Caldesmon是一种平滑肌肌动蛋白和钙调蛋白的结合蛋白,被认为是一种平滑肌细胞的标志物,存在于平滑肌或非平滑肌细胞中的一种细胞骨架蛋白。它可以与肌动蛋白、肌球蛋白、原肌球蛋白和钙调蛋白相互作用,是平滑肌细胞的一个标志物,可用于判断子宫肿瘤来源。在结肠直肠肿瘤中是区分纤维细胞和肌纤维细胞的一个标志