土霉素盐酸盐溶液 ,100mg/mL10mL图片柱式DNA提取系列产品
2 柱式RNA提取系列(包括动物,血液,植物,细菌RNA提取)
3 5分钟超快DNA电泳液
4 一步式质粒DNA提取系列产品
5 “绿如蓝”DNA染料
6 固相RNase清除剂
土霉素盐酸盐溶液 ,100mg/mL10mL图片实验步骤:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
土霉素盐酸盐溶液 ,100mg/mL10mL图片的详细介绍:
土霉素盐酸盐溶液 ,100mg/mL10mL图片操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
土霉素盐酸盐溶液 ,100mg/mL10mL图片公司的产品目前有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
REN Protein Human 重组人 Renin 蛋白 (His 标签)
RBP4 Protein Human 重组人 RBP4 蛋白 (His 标签)
PTPN1 Protein Human 重组人 PTP1B / PTPN1 蛋白 (His 标签)
SELPLG Protein Human 重组人 PSGL-1 / CD162 蛋白 (His & Fc 标签)
PRSS8 Protein Human 重组人 Prostasin / Prss8 蛋白 (His 标签)
PLAU Protein Human 重组人 Urokinase / PLAU 蛋白 (His 标签)
PIGR Protein Human 重组人 PIGR 蛋白 (365 Ser/Gly, His 标签)
PDCD1LG2 Protein Human 重组人 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His & Fc 标签)
PDGFRA Protein Human 重组人 PDGFRa / CD140a 蛋白
PDGFRA Protein Human 重组人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (Fc 标签)
PDGFC Protein Human 重组人 PDGF-C 蛋白 (Fc 标签)
PDCD1 Protein Human 重组人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His 标签)
PDCD1 Protein Human 重组人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His & Fc 标签)
Subcellular Location : Nucleus. Cytoplasm. Mitochondrion. Cytoplasm, cytoskeleton, centrosome. Note=Cytoplasmic during the interphase. Reversibly translocated from cytoplasm to nucleus when phosphorylated before G2-M transition when associated with cyclin-B1. Accumulates in mitochondria in G2-arrested cells upon DNA-damage.
Tissue Specificity : Isoform 2 is found in breast cancer tissues.
Post-translational modifications : Phosphorylation at Thr-161 by CAK/CDK7 activates kinase activity. Phosphorylation at Thr-14 and Tyr-15 by PKMYT1 prevents nuclear translocation. Phosphorylation at Tyr-15 by WEE1 and WEE2 inhibits the protein kinase activity and acts as a negative regulator of entry into mitosis (G2 to M transition). Phosphorylation by PKMYT1 and WEE1 takes place during mitosis to keep CDK1-cyclin-B complexes inactive until the end of G2. By the end of G2, PKMYT1 and WEE1 are inactivated, but CDC2 and CDC25B are activated. Dephosphorylation by active CDC2 and CDC25B at Thr-14 and Tyr-15, leads to CDK1 activation at the G2-M transition. Phosphorylation at Tyr-15 by WEE2 during oogenesis is required to maintain meiotic arrest in oocytes during the germinal vesicle (GV) stage, a long period of quiescence at dictyate prophase I, leading to prevent meiotic reentry. Phosphorylation by WEE2 is also required for metaphase II exit during egg activation to ensure exit from meiosis in oocytes and promote pronuclear formation. Phosphorylated at Tyr-4 by PKR/EIF2AK2 upon genotoxic stress. This phosphorylation triggers CDK1 polyubiquitination and subsequent proteolysis, thus leading to G2 arrest. In response to UV irradiation, phosphorylation at Tyr-15 by PRKCD activates the G2/M DNA damage checkpoint.
Polyubiquitinated upon genotoxic stress.
Similarity : Belongs to the protein kinase superfamily. CMGC Ser/Thr protein kinase family. CDC2/CDKX subfamily.
土霉素盐酸盐溶液 ,100mg/mL10mL图片Contains 1 protein kinase domain.
Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P06493.3
Cdc2蛋白激酶也被称作细胞周期蛋白依赖性激酶1 (cyclin-dependent kinase 1, CDK1)或M期促进因子(M-phase promoting factor, MPF),是细胞周期蛋白依赖性激酶家族成员,参与真核细胞周期的调控。Cdc2-cyclin B活化后可启动有丝分裂,其活化受到严格调控。Cdc2-cyclin B是丝氨酸/苏氨酸蛋白酶,由催化亚基