特别提示:包括血浆/血清游离DNA提取试剂盒(磁珠法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:血浆/血清游离DNA提取试剂盒(磁珠法)
英文名称:Magnetic Serum/Plasma DNA Extraction Kit
产品货号:WH0115
产品规格:400μl×96次
本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统,从血清,血浆等样本中分离纯化高质量游离DNA。独特包埋的磁珠,在一定条件下对核酸具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。整个过程安全、便捷,提取的游离DNA得率高,纯度高,质量稳定可靠,尤其适合高通量工作站的自动化提取。
产品特点:
·本试剂盒即可满足手工提取也可适用于多种高通量平台批量提取。
·本试剂盒所得产物满足下游各类检测实验以及NGS分析。
·本产品适用于0.4- 5ml体积的血清血浆样本。
试剂盒组成:
组分 | 0.4ml×96次 | 裂解液CFL | 45ml | 去蛋白液PD | 120 ml | 漂洗液RW | 40 ml | 洗脱缓冲液TBC | 30ml | Proteinase K | 4×1 ml | 磁珠悬浮液WD | 3×1 ml |
储存条件:室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。)
1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的核酸片段较小且提取量降低。
2.用前请在裂解液CFL中加入异丙醇,漂洗液RW加入无水乙醇。加入体积参照标签。
3.本试剂盒组分以0.4 ml样本为基础,如果提取其它规格的样本,试剂不够时需另行购买。
操作步骤:
使用前请在裂解液CFL加入异丙醇,漂洗液RW加入无水乙醇。加入体积参照标签
1.根据样品体积按下表选择合适规格的离心管并依次添加试剂。
样品量 | 耗材规格 | 裂解液CFL | Proteinase K | 磁珠WD | 400μl | 1.5ml离心管 | 600μl | 40μl | 30μl | 600μl | 1.5ml离心管 | 900μl | 60μl | 30μl | 2ml | 5ml离心管 | 3ml | 200μl | 45μl | 4ml | 15ml离心管 | 6ml | 400μl | 90μl |
注意:本试剂盒以0.4 ml样本为基础,如果提取其它规格的样本,请按照表格中的用量进行增加。
2.涡旋振荡混匀后室温孵育20 min,期间每3-5 min上下颠倒混匀10 sec,使磁珠和核酸充分结合。孵育结束后需简短离心以去除管盖内壁的液滴。
3.将离心管置于磁力架上2 min,待磁珠完全吸附后用移液器小心去除液体,取下离心管。
4.加入750μl去蛋白液PD,上下颠倒混匀30 sec使磁珠充分悬浮,短暂离心以去除管盖内壁的液滴。
注意:如果离心管壁上有残留磁珠,可以再加入200 μl去蛋白液PD漂洗,然后一并转移到1.5ml离心管中。
5.将离心管置于磁力架上1 min,待磁珠完全吸附后用移液器小心去除液体,取下离心管。
6.加入750μl漂洗液RW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),上下颠倒混匀30 sec使磁珠充分悬浮,短暂离心以去除管盖内壁的液滴。
7.将离心管置于磁力架上1 min,待磁珠完全吸附时用移液器小心去除液体,取下离心管。
8.重复步骤6和7一次。
9.将离心管置于磁力架上,吸出所有液体弃去,室温晾干5-10min。
注意:乙醇残留会YZ后续的酶反应,所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间,以免难以洗脱核酸。
10.加入30- 65 μl洗脱缓冲液TBC,用移液器吹吸使磁珠重新悬浮,56℃孵育5 min,期间每2 min轻轻晃动使核酸充分洗脱。
11.将离心管放置于磁力架上静置2 min,待磁珠完全吸附时小心将核酸溶液转移至新的离心管中,并于适当条件保存。
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名称:痰液DNA提取试剂盒
货号:BTN111201
规格:50次
痰液是重要的检测样品,可以用于诊断肺癌,肺结核等各种疾病。但是从痰液中纯化DNA十分棘手,为此本公司开发了本产品,专用于从痰液或其他上呼吸道分泌样品中纯化DNA,用于后续的分子生物学分析。
产品特点:
1. 每次可以处理10-20mL痰液,得到2-5μg DNA。
2. 纯度高,可直接用于后续得PCR检测。
3.一管式操作,减少污染,节约成本。
4.含痰液保存液(溶液A),便于取样和运输。
5. 环保,不需要使用苯酚和lǜ仿等有毒的有机溶液。
试剂盒组成:
成分 | 规格 | 溶液A(痰液细胞固定液) | 500ml | 溶液B(痰液解稠剂) | 500ml | 溶液C | 30ml | 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
一:痰标本的获取与保存(注意:痰液以及下列操作的废弃液都可能含有致病性的结核杆菌等致病菌,需按传染源相关规定流程进行操作)
1. 每例患者在常规痰标本采样时,zuì好连续三天采集三次样品以防误差。具体做法是先在每个50mL的痰液收集管内新鲜加入10mL溶液A和10mL溶液B,待患者晨起漱口后,咳深部痰7~8口(约10-20mL),收集到装有溶液A和溶液B混合液的痰液管收集内,混匀后储于4℃冰箱或阴凉处。第二、三天重复此操作。取足三管后一起送实验室,4℃冰箱保存直到使用。
2. 使用时,在室温反复振摇装有样品(总体积约30-40mL)的痰液收集管5~10分钟,充分混匀直到痰液中无粘稠痰块而呈均匀的液相。
3. 4℃2500g离心5分钟,弃上清。
4.沉淀再用自备的PBS液洗两遍。
5. 所得沉淀可以直接用于涂片,用于比较细胞形态学分析。也可以将细胞沉淀在0.2mL PBS缓冲液中重悬后转入1.5mL螺旋盖塑料离心管,-20℃冰箱长期保存,或立即用于下步的DNA提取。为避免盖子崩开而出现交叉污染或痰液的分枝杆菌污染环境,建议不要使用压盖式塑料离心管。同时zuì好设置一个阳性和一个阴性对照。
二:DNA提取
6.在上步所得的0.2mL样品中加入0.6mL溶液C。溶液C容易形成沉淀,用前需37℃加热融化并摇晃均匀。
7.室温放置10分钟。此间可以在每个管外壁上做个标记,以在下步区别向心面和离心面。
8. 振荡数秒后加入0.7mL自备的异丙醇,旋紧盖后振荡30秒混匀。
9. 把离心管的向心面对向转头,13,000-15000g室温离心至少15分钟。
10.小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的DNA沉淀(此时可能看不见)。
11. 加入1.0mL 70%乙醇,振荡数秒后 15000g室温离心5分钟。注意:在离心机中放置离心管时将其向心面对向转头的ZY。
12.小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的DNA沉淀(此时呈膜状沉淀)。
13. 将离心管放回离心机再短暂离心数秒,然后用移液器移弃约50μL残留液体(70%乙醇),否则它会影响后续反应。
14. 加入200μl RNase-free水,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状DNA沉淀,溶液将呈混浊状,含少量不溶,短暂离心后存上清(含DNA)。
15. 直接取适量用于PCR,样品使用量不超过PCR体系的1/2。剩余DNA样品可以室温放置2小时,也可保存于-80℃保存一个月。
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