细胞培养技术服务
1、 细胞培养服务流程
① 从动物组织切割、分离所需培养的组织(原代培养);
② 用灭菌PBS多次清洗组织,充分剪碎组织,用灭菌PBS清洗组织;
③ 静置数分钟,使组织沉淀于管底,弃上清;
④ 胰蛋白酶充分消化组织,弃上清;
⑤ 加入含小牛血清或胎牛血清的培养基,置于CO2培养箱培养;
⑥ 从CO2培养箱取出生长状态良好的单层原代培养细胞或传代培养细胞,于超净工作台中弃去培养液,用灭菌PBS清洗;
⑦ 加入适量胰蛋白酶消化液,静置片刻;
⑧ 倒置显微镜下观察细胞消化状态,如变圆,立即弃去消化液,加入培养液终止消化;
⑨ 终止培养,去除培养上清液;
⑩ 反复吹打培养液,制成单细胞悬液,分置于多个细胞培养瓶/皿,进行传代培养;
注:①~⑤为原代细胞培养主要步骤,⑥~⑩为传代细胞培养主要步骤。