上海鸿立生物根据客户需求培养包括干细胞,原代细胞,肿瘤细胞等各种细胞包括造模及细胞功能试验
细胞类型 细胞类型根据是否附于支持物上生长的特性,分为 贴附型、悬浮型。
贴附型 细胞贴附在支持物表面生长,只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞(Anchorrage-dependent cells)这种现象与细胞分化有关。
贴附型细胞的分型
1.成纤维型细胞:(fibroblast) 来自中胚层
特点:与体内成纤维细胞形态相似,胞体梭型或不规则三角形,ZY有圆形核,胞质向外伸出2~3个长短不同的突起。细胞在生长时呈放射状,漩涡或火焰状走行。
起源:细胞来自中胚层间充质组织。
除真正的成纤维细胞、心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮细胞。
注意:细胞在培养时成为成纤维型细胞是一种惯称,与体内细胞不同。
2.上皮型细胞(epithlium cell type) 来自外胚层。
特点:扁平不规则多角型、圆形核、细胞紧密相连成细胞增殖数目增多时,整个上皮膜随之移动。边缘细胞很少脱离细胞群而单独活动“ 拉网”现象与起源内外胚层组织有关。
组织: 皮肤表皮及其衍生物(汗腺、皮脂腺)消化道分上皮、肝、胰、肺泡上皮。
3. 游走型细胞(wandering cell type)
特点:在支持物上散在生长,不连接成片,胞质伸出伪足或突起呈活跃的游走或变形运动,速度快不规则, 密度大连接成片呈多角形不易与其他类型的细胞 区别。
4. 多形型细胞 (polymorphic cell type)
特点: 无规律的形态,如神经细胞。
悬浮型 特点: 不贴附在支持物生长,胞体圆形,在培养液中生长空间大,可长时间的生长,繁殖旺盛便于做细胞代谢研究。S180肉瘤、血液里的白细胞、K562、 HL-60。
分型的目的:
方便描述细胞在培养过程中的形态变化。培养条件好时,细胞相对稳定,可反映出起源、正常异常的区别,作为判定细胞生物学性状指标。
强调:一般形态并不是一项可靠指标要受各方面影响。
如:反复开关温箱、温度、C02的浓度、培养基变碱、支原体、pH值。细胞在接种时呈三角型状态,经培养一定时间后,细胞在传代前已形成上皮型细胞。
编辑本段细胞生长与增殖 培养细胞的生存环境是培养瓶、器皿或其他容器,生存空间及营养是有限的。当细胞增殖到一定密度后,分离出一部分细胞和更新营养液,使细胞更好地生存,这一过程称之为“ 传代”(passage或subculture)。
值得注意的是:每次传代细胞在生长和增殖方面受到一定的影响。
细胞生命期 指细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。一般根据细胞种类、性状和原供体的年龄的情况而定。
如:二倍体成纤维细胞,在不冻存和反复传代条件下可传30~50代,相当于150~300个细胞增殖周期,能维持一年左右的生命,细胞便开始凋亡(apoptosis)。 细胞在生存过程中经历以下三个阶段
1.原代培养期(primary culture)
组织到次传代 时间大约为1~4周
细胞培养
特点:
细胞活跃移动,分裂,但不旺盛多呈二倍体核型。
原代与体内原组织形态结构和功能活动基本相似。
各细胞的遗传性状互不相关,细胞相互依存性强,如果把这种稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养细胞克隆的形成率(cloning efficiency)下降,表明细胞独立生存性差。
2.传代期(passage)
初代培养细胞一经传代便称之为细胞系(cell line)
特点:
细胞增殖旺盛,并维持二倍体核型,也叫二倍体细胞系(diploid cell line)为了保存二倍体细胞性质,细胞应在初代或传代早期冻存为好。
一般细胞在10代以内冻存。
冻存配方:
向培养液加入保护剂二甲基亚砜(DMSO)或甘油,封入安瓶中。
存于在液氮中温度可达到-196℃,可长期储存。如解冻后细胞复苏,仍能继续增殖生长,细胞性状不受影响,成为保存细胞Z主要的手段。
3.衰退期
特点:细胞仍生存 增殖减慢 不增殖 轮廓增强 衰退凋亡
注意:细胞在三期中的任何一期(一般发生在传代后期或衰退期)在某些因素影响下,如血清质量不佳、病毒污染、温度和pH不稳等,细胞可能发生自发转化(spontaneous transformation);
细胞可能获得永生性(immortality) 或称为恶性性(malignancy)。细胞获得持久性的增殖能力,这样的细胞群体称为连续细胞系(continuous cell line)。而细胞获得不死性后,细胞核型大多变成异倍体(heteroploid)接触YZ消失。
资料下载:
实验技术服务1.jpg
附件下载 (下载 56 次)
请 [登录] 后再下载!