GelRed 41003 and 41005Gelgreen 核酸凝胶染料

 GelRed and Gelgreen 核酸凝胶染料
由美国BIOTIUM公司技术专家研发的GelRed 和GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的的荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。目前大多数商业化的核酸染料（凝胶染色试剂）总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不完全令人满意。例如，虽然EB (溴化乙啶）作为目前使用Z广泛的核酸凝胶染色试剂，能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度，但它是一种高诱变性的化学物质。而且EB染色后具有较高的背景荧光信号（如图1）。SYBR Green I 和SYBR Gold 也被厂家宣传为Z灵敏的凝胶染色试剂。但SYBR Green I 尤其是SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解，稳定性差导致染色效果极不可靠。SYBR safe 被认为是市场上较为安全的核酸染料 ，但它的染色效果还远不及SYBR Green I 。 特性:
 高灵敏度
GelRed 和GelGreen 是目前市场中Z灵敏的凝胶核酸染料
 稳定性极好
可以使用微波炉加热，可以在室温下保存
 更安全
艾姆斯氏试验结果表明，该染料的诱变性远小于 溴化乙锭 （EB ）
 广泛的适应性
适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色
 染色过程简单
与EB 一样，在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗
 对DNA 和RNA 的迁移影响极小
对核酸迁移的影响小于SYBR Green I
 与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置兼容
使用312nm 激发的UV 凝胶成像系统时，GelRed 可以的替代EB ；使用254nm 激发的UV 凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时，GelGreen 足以替代任意一种SYBR 染料（见图4 中的光谱图）
Biotium公司的GelRed 和GelGreen 无论用于预制凝胶染色还是凝胶电泳后染色，都表现出了极高的灵敏度。为配合312 nm UV 凝胶成像系统而设计的GelRed ，在使用了我们新开发的具有专利的试验步骤后（该试验步骤中使用稀释的NaCl 溶液替代传统的TBE 缓冲溶液），在凝胶电泳后染色中优于或者至少相当于SYBR Gold 。但与SYBR Gold 不同，GelRed 在预制凝胶中使用时仍然有极高的灵敏度，事实上GelRed 在检测低浓度、微量DNA 方面比EB 表现出更高的灵敏度，尤其对小分子量的DNA 检测非常灵敏（图1）。GelGreen 可以满足使用488 nm 激光凝胶扫描仪或者可见光激发的Dark Reader 的研究人员的使用要求。GelGreen 无论是在预制凝胶还是凝胶电泳后染色中都与SYBR Green I 灵敏度相当，但不存在后者的不稳定性问题。实际上，GelRed 和GelGreen ，特别是GelRed 非常稳定，可以长期在室温下保存。当这两种染料稀释在TBE 或者类似的电泳缓冲溶液中时甚至可以使用微波炉加热，便于采用常规方法制备预制凝胶。含有染料的预制凝胶可以成批制备，长期保存。
同样重要的是，GelRed 和GelGreen 相比EB 或SYBR Green I 提高了安全性。 独立的测试服务公司（Litron Laboratories, Inc. ）进行的标准艾姆斯氏测试结果表明， 在18.5 μg /mL （该浓度远高于推荐用于电泳后染色的 约4 μg/mL 的3X 染色液 ）浓度下，GelGreen 没有诱变性，而GelRed 也仅在S9 代谢活化时有微弱的诱变性。GelRed 和GelGreen 的特殊化学结构使其难以穿透细胞膜进入细胞，正是这一特性降低了染料的细胞毒性。如图3。相反，SYBR Green I 广泛地用于活细胞线粒体和核DNA 染色，这正是由于它能快速的被细胞吞入。由于已知SYBR Green I 对紫外线导致的突变有强烈的增强作用（Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ），因此它的高细胞膜透性使它在紫外环境观察时成为凝胶染色的主要有害物质。
      安全性测试   
      SYBR Dyes    GelRed    GelGreen
A) 5 min. incubation     
 要想让DNA染色剂安全，WY的办法就是设法不让其穿透细胞膜进入活体细胞内，Biotium 做到了！
B) 30 min incubation     
 图3. 在37°C下，分别使用1X SYBR Green I, SYBR Safe, GelRed and GelGreen 对HeLa 细胞进行孵化，并分别在5分钟（A)和30分钟（B）后观察。实验显示SYBR染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色（以上仅图示SYBR Green 1），而GelRed 和GelGreen 则因为不能穿透细胞膜而完全没有进入细胞内, 足以证明GelRed和GelGreen是安全的。
 图4. GelGreen （绿色）GelRed （红色）在PBS 缓冲溶液中结合dsDNA 后的激发和发射光谱。
 图5. 室温下，GelRed TM （500 nm ）和SYBR Gold （488 nm ）稀释在1 ×TBE 凝胶染色液中测得的吸光度随时间变化图。GelRed 和SYBR Gold 初始的吸光度值分别为0.029 和0.051 。
 Table A. 订货信息Biotium
Cat#       Product Name       Unit Size  Unit Price
41001     GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 3X in water   4.0 L       ¥1976
41002     GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO       0.5 mL    ¥1117
41003     GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water  0.5 mL    ¥1176/¥720.00
41004     GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO    0.5 mL    ¥988
41005     GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water      0.5mL     ¥1117
 
常用核酸染色剂选择依据
名称       灵敏度    稳定性    适用性    安全性    价格
Gel red（UniRed）极高       极高       通用大小片段电泳染色       美国环保局安全认定    中
Sybr green I   高    较差       100bp以上片段，荧光定量低毒       高
Sybr Green II高    较差       单链核酸分子       低毒       高
Gold View I    较高       一般       500bp以上双链核酸     高毒性    低
EB   高    极高       100bp以上电泳染色     强致癌    低
 
产品编号       产品描述       产品包装       产品价格       折扣价格
SYBR-I-PCR SYBR Green I核苷酸胶体染料（20×DMSO溶液）（PCR级）500ul      ￥260.00￥200.00
SYBR-II        RNA gel stain 10,000×concentrate in DMSO* (Electrophoresis Grade) 50ul       ￥460.00
￥380.00
G05020 Gold view I EB替代品，适用于>1000bp核酸片段！     1ml        ￥120.00￥100.00
E05020   10mg/ml        5ml        ￥80.00   ￥80.00
SYBR-I SYBR Green I 与双链DNA的亲和力非常高，因此可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如：Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有YZ作用。    50ul       ￥260.00
 
￥200.00
G05010 GelRed集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的的荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。     500ul      ￥720.00
 
￥600.00
北京优尼康生物科技有限公司http://www.bjunique.com/ProductList1.aspx
我们是以专业经营进口、国产生物科研仪器、试剂、耗材，专业进行生物及环保产品的技术开发与技术服务的高科技公司。
 目前经营的产品品Pai有：美国Kimble、加拿大Labplas、芬兰雷勃、伯乐、宝特、梅特勒、赛多利斯、大龙、SANYO、Shellab、eppendorf、Gilson、Heraeus、ABI、REVCO、Sigma、Fluka、Amresco、Merck、Roche、Pharmacia、Gibco、HyClone、Omega、Promega、Corning、Costar、Orang、Greiner、Axygen、Brand、SCHOTT、RD、cytimmune、peprotech、diaclone、biotium、biocytex、PeproTech、DSL 等。
 特色优势产品  美国Kimble微量电动匀浆器  美国W.s.tyler筛分仪 加拿大Labplas无菌采样袋 美国Miliipore细胞电阻仪 瑞士Keller热珠灭菌器  杜恩斯组织匀浆器Gelred核酸染料等