【表述】
Pfu DNA 聚合酶 源自强烈炽热球菌(Pyrococcus furiosus),本产品由含有克隆Pyrococcus furiosus 的pol 基因的大肠杆菌诱导表达,再经多次柱层析分离纯化而得,分子量为90113 Da,蛋白电泳纯度>95%。Pfu DNA 聚合酶具有高度热稳定性,95℃加热2小时,仍可保持95%以上活力,依赖模板,催化5’→3’DNA合成。Pfu DNA 聚合酶不具 5’ →3’外切酶活性,具有3’→5’外切酶活性,是已知耐热DNA聚合酶中错误率的酶,特别适用于需高保真度的PCR实验。
【产品特征】
•蛋白电泳纯度>95%,不含DNase和RNase,不含核酸残留。
•高度热稳定性,95℃2小时仍保持95%以上的活力。
•是已知的DNA聚合酶中错误率的酶,特别适用于对 PCR 保真性要求较高的实验,如基因筛选、克隆表达、突变检测、定点突变等等。
•无 5 ' 到 3 ‘外切酶的活性, 适用于长链PCR扩增。
•无 3 ‘端加 A 的功能,产物为平端,如果需要做 T - A 克隆,需要做添加A 。
【反应缓冲液】
10 × PCR buffer:500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 1% TritonX-100 和 20mM MgSO4 。
【储存缓冲液】
Storage buffer: 20mM Tris-HCl (pH 8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% 甘 油, 0.5% Nonidet -P40 和 0.5% Tween20 。
【Pfu酶单位定义】
在 74℃ 条件下, 30 分钟内催化 10nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为: 50mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 200mM dNTP( 含未标记和标记 [3H] dTTP ), 10mg 活化的小牛胸腺 DNA 和 0.1mg/ml BSA, 终反应体积为 50ml 。
【储存条件】:-20℃
【产品规格】
品名 | 货号 | 规格(5U/μl) |
Pfu DNA Polymerase | T120401 | 500U |
Pfu DNA Polymerase | T120402 | 2000U |
温馨提示:不可用于临床ZL。