miRNA检测服务，miRNA qRT-PCR检测服务

                   miRNA定制检测服务

S-poly(T)技术进行miRNA表达检测优势:
    现有绘制miRNA表达谱的主要技术miRNA芯片、高通量小RNA测序等，其结果必须通过qPCR技术的验证；由于灵敏度所限，
芯片和测序技术常出现漏检和误检等情况。用qPCR技术进行miRNA的表达谱分析将大幅提高差异miRNA的检出率和检测准确性。    基于S-poly(T)原理开发的miRNA qPCR表达谱分析技术，是将miRNA进行优化分组，每组包括7个miRNA及1个内参；
优化分组限度提高了cDNA合成的特异性，避免引物之间的相互干扰。数据显示， S-Poly(T) plus miRNA表达谱分析技
术与现有市面上的同类产品相比，具有更高的灵敏性、特异性及性价比。    由于灵敏度的显著提高，S-poly(T)技术特别适合从血清/血浆、尿液、粪便等含量甚微的材料中检测miRNA的表达。
本公司也开发了这些材料的RNA提取试剂盒，建立了完整的体液/排泄物miRNA检测方案及服务平台。

S-Poly(T)法检测miRNA原理:
S-Poly(T)^®法融合了传统的Stem-loop法和Poly(A)加尾法的优点，使用了与miRNA 3`端特异互补的~6个碱基和11个d(T)组成的S-Poly(T)^®特异性逆转录引物，在较高温度下(≥42°C)对加尾后的miRNA进行链cDNA的合成，不仅显著提高S-Poly(T)逆转录引物与目的miRNA互补结合的特异性和热稳定性，而且逆转录效率更高，从而大幅提高目的miRNA链cDNA的合成及后续qPCR效率。qPCR反应使用特异上游引物、通用下游引物和通用荧光探针对miRNA进行检测。示意图如下：



                                     图. S-Poly(T)plus法检测miRNA原理图

miRNA检测服务流程：




miRNA检测（按数目分类）


miRNA表达谱检测（按物种分类）



使用S-Poly(T)法发表的部分文章：5.  Kang K, Peng X, Zhang X, Wang Y, Zhang L, Gao L, Weng T, Zhang H, Ramchandran R, Raj JU et al: MicroRNA-124 suppresses the  transactivation of nuclear factor of activated T cells by targeting multiple genes and inhibits the proliferation of pulmonary artery  smooth muscle cells. J Biol Chem 2013, 288(35):25414-25427. (IF= 4.651)
6. Kang K, Zhang X, Liu H, Wang Z, Zhong J, Huang Z, Peng X, Zeng Y, Wang Y, Yang Y et al: A Novel Real-Time PCR Assay of microRNAs  Using S-Poly(T), a Specific Oligo(dT) Reverse Transcription Primer with Excellent Sensitivity and Specificity. PLoS One 2012, 7(11):e48536-48545. (IF=4.1)
7. Liu B, Dou W, Ding TB, Zhong R, Liao CY, Xia WK, Wang JJ: An analysis of the small RNA transcriptome of four developmental stages of the citrus red mite (Panonychus citri). Insect molecular biology 2014, 23(2):216-229. (IF= 3.044)
8. Kang K, Zhong J, Jiang L, Liu G, Gou CY, Wu Q, Wang Y, Luo J, Gou D: Identification of microRNA-Like RNAs in the Filamentous Fungus Trichoderma reesei by Solexa Sequencing. PLoS One 2013, 8(10):e76288. (IF=3.73)
9. Bao Y, Guo Y, Li Z, Fang W, Yang Y, Li X, Li Z, Xiong B, Chen Z, Wang J et al: MicroRNA profiling in Muc2 knockout mice of colitis- associated cancer model reveals epigenetic alterations during chronic colitis malignant transformation. PloS one 2014, 9(6):e99132.  (IF=3.53)

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