生物素随机引物DNA标记试剂盒优惠促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多生物素随机引物DNA标记试剂盒等分子生物学试剂产品请联系我司咨询订购。
名称:生物素随机引物DNA标记试剂盒
产地:国产|进口
英文名:Biotin Random Prime DNA Labeling Kit
编号:YT031
规格:10次
品Pai:百奥莱博
生物素随机引物DNA标记试剂盒是一种通过随机引物标记反应产生生物素标记DNA探针的试剂盒。本试剂盒标记的生物素DNA探针可以用于常规的Northern、Southern、colony或plaque hybridization、dot或slot blot、原位杂交等。
在Klenow酶(Klenow fragment,3'-5'exo-)催化下,通过随机引物标记反应(random prime labeling)可以把生物素标记的Biotin-11-dUTP掺入到新合成的DNA探针中,这样就可以产生生物素标记的DNA探针。在随机引物标记反应过程中,一些标记好的DNA探针可以被Klenow酶从模板DNA链上驱赶下来。这样在模板量较少的情况下,通过随机引物标记反应,可以产生比模板DNA量更多的生物素标记DNA探针,可多达1-15倍左右。
本试剂盒可以用于多种DNA模板的标记,包括DN断、线性化的质粒或cosmid、超螺旋DNA等。用于本试剂盒的模板DN断应不小于100bp,小于100bp的DNA模板可以使用我公司生产的生物素3'末端DNA标记试剂盒(D3106)进行DNA探针标记。
用于本试剂盒的模板DNA的量应不少于10ng,推荐的模板用量为100ng-1μg。
本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control DNA,可以用作检测生物素DNA探针标记效率的对照。
生物素标记DNA可以使用我公司生产的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(D3308)或其它适当试剂盒进行检测。
本试剂盒可以用于10个标记反应。
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
需自备用于探针标记效率检测的相关试剂。
使用说明:
1. 在一离心管或PCR管内加入100ng-1μg DNA模板,再加入适量试剂盒提供的Ultrapure Water,至总体积为34μl。说明:通常100-300ng DNA模板已经足够用于一次标记反应。
2. 加入10μl Random Primer in Buffer (5X),混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
3. 沸水浴加热5分钟,或在PCR仪上100℃加热5分钟(如果不能设置100℃,99℃加热5分钟也完全可以)。
4. 立即放置到预先准备好的冰水浴中至少2-3分钟。
5. 加入5μl Biotin-Labeling Mix。
6. 加入1μl Klenow Fragment,混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
7. 37℃孵育1小时或过夜(不宜超过20小时)。37℃孵育过夜可以显著增加生物素标记DNA的产量,因此推荐孵育过夜(12-20)小时。
8. 加入3μl探针标记终止液,混匀,终止标记反应。至此标记反应已经全部完成,标记好的DNA可以-20℃保存。
9. 此时探针可以直接用于探针标记效率的检测及Southern、Northern等后续操作。