北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖10%预制胶,12孔 蛋白质研究在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:10%预制胶,12孔 蛋白质研究
编号:SY0373
产地:国产|进口
规格:1盒(10块)
英文名:Precast Protein Gels, 10%, 12 wells
本品通过pH中性缓冲液制备,丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺配比是29:1,其规格为浓缩胶5%,分离胶10%,胶板尺寸10×8cm,凝胶厚度1 mm,12孔梳齿,单孔上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液,蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad,天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比,使用预制胶具有以下优点:1)即开即用,不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固,节省了宝贵的时间和精力;2)不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂(丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺:神经毒性和遗传毒性;TEMED:强神经毒;过硫酸铵:可严重损伤呼吸道,眼睛,皮肤);3)大规模生产,胶与胶之间重复性好,质量稳定,不像手工灌胶那样结果差异大。
使用方法
1)剪开包装取出胶,撕去胶板底端胶纸,将预制胶固定在电泳槽中,加入电泳缓冲液没过梳齿部位,双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢(一定要慢,否则会将胶齿拔断或拔歪)拔出,在前后板的上方ZY卡上一个“V”型卡(通过加固前后板,不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙,还可稳定跑胶质量,电泳过程中“V”型卡不可取出),上样后进行电泳,电泳后取出胶板,用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开,将胶取出,弃去塑料板。
2)电泳:使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液(tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%)。推荐使用低压100V,15min换高压150V跑至电泳结束。
3)转膜:使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液(含 20%甲醇或乙醇),操作与实验室原有操作完全相同。
储存条件:4℃,有效期一年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本品含有的部分试剂如丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺有毒,对人体有害,请注意适当防护。
3)电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液,试剂纯度不够,反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ,因为引入的钠离子和氯离子会影响电泳效果。
4)电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸,否则电路不通,无法电泳。
5)拔梳子时Z好浸没在电泳缓冲液中拔,一方面由于液体润滑梳子更容易拔,另一方面不会产生气泡。另外拔梳子时越慢越好,如此可防止梳齿被拔断或拔歪。
6)在电泳后开板取胶时,用小号一字螺丝刀或中号镊子插入左右两板间缝隙,用力搬动,两板即可应声分开,此时两板底部还不能分开,要通过掰开两板取出凝胶。
7)在上样前,使用“V”型卡加固前后板(加样和电泳过程“V”型卡不可移动或拔出),使用时只需将一个“V”型卡“轻轻地”(不必卡到底,不掉即可)卡在前后板的上端中间区域,可确保上样不会产生板胶间的缝隙从而导致样品泄露,电泳时“V”型卡不必取出如此可有助于稳定跑胶质量。
8) 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露,可通过两种方式解决本问题:一是内槽加满缓冲液,外槽液面加至距内槽液面3-5mm,从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装,使其没有凸起的平滑面朝外,从而防止漏液。
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10%预制胶,12孔 蛋白质研究
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