一:合成 PCR 用的 1st-strand cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系:RNA RNA 100-500 ng poly(A) mRNA 10-500 ng或专一的 RNA 0.01 pg-500 ng
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或 RNA 模板专一性引物 15-20 pmol
注意:随机引物与 RNA 模板的比例跟 cDNA 合
成的平均长度成反比。
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20 uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,不需要纯化。核酸稀释液,测 OD 专用100mL产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA 链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)GX合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. Z长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
C5orf515号染色体开放阅读框51抗体
C3orf703号染色体开放阅读框70抗体
C2orf682号染色体开放阅读框68抗体
C2ORF472号染色体开放阅读框47抗体
CD83CD83抗体
C17orf5917号染色体开放阅读框59抗体
C17ORF3917号染色体开放阅读框39抗体
Calcium Sensing Receptor钙敏感受体1抗体
Calponin 1 + 2 + 3钙结合蛋白Calponin抗体
C2orf442号染色体开放阅读框44抗体
C2orf552号染色体开放阅读框55抗体
C2orf572号染色体开放阅读框57抗体
C2orf292号染色体开放阅读框29抗体
C3orf213号染色体开放阅读框21抗体
C1ORF741号染色体开放阅读框74抗体
C1QTNF10补体C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白10抗体
C1orf931号染色体开放阅读框93抗体
C1orf941号染色体开放阅读框94抗体
C1orf961号染色体开放阅读框96抗体
C1orf411号染色体开放阅读框41抗体
C1orf1441号染色体开放阅读框144抗体
C4orf34号染色体开放阅读框3抗体
Cathepsin S组织蛋白酶S抗体
Cell death inducing protein细胞死亡诱导蛋白抗体
Cipar1前列腺雄激素YZ信号蛋白1抗体
phospho-cardiac Troponin I (Thr143)磷酸化心肌肌钙蛋白抗体
PVRL1脊髓灰质炎受体相关蛋白1抗体
C19orf7319号染色体开放阅读框73抗体
CD11b整合素αM抗体Integrin αM
CASPR轴突蛋白4/少突胶质细胞抗体
Caspr2轴突相关CNTP2蛋白抗体(少突胶质细胞)
CSNK1D酪蛋白激酶δ1抗体
CD166活化白细胞粘附分子抗体
C1orf1911号染色体开放阅读框191抗体
Cox A16 polymerase3D柯萨奇病毒A16型聚合酶3D
CNTF睫状神经营养因子抗体
CK16细胞角蛋白16抗体
C4orf17 4号染色体开放阅读框17抗体
CYFIP2细胞质脆性X智力低下蛋白结合蛋白2抗体
CRLF2胸腺基质淋巴细胞生成素受体抗体
CK12细胞角蛋白12抗体
Ceramide glucosyltransferase 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗体
CXCR3细胞表面趋化因子受体3抗体
Complement C2补体C2抗体
CD133造血干细胞抗原CD133抗体
CD14内毒素受体抗体
CD20CD20抗体
CD24CD24抗体
IL2RA白介素2受体a链/IL-2RA抗体
CD272B和T淋巴细胞衰减蛋白抗体
CD4CD4抗体
CD44CD44抗体
核酸稀释液,测 OD 专用100mLCD45白细胞共同抗原抗体
CD5CD5抗体
ICAM1细胞间粘附分子-1抗体
CD56神经细胞粘附分子1抗体
CD62LL选择素抗体
CD68CD68抗体
C6orf226 6号染色体开放阅读框226抗体
connexin 30间隙连接蛋白30抗体
C2orf692号染色体开放阅读框69抗体
C3orf183号染色体开放阅读框18抗体
CCL4巨噬细胞炎症因子1β /MIP-1β抗体
CD147细胞外基质金属蛋白酶诱导因子抗体
CD11b整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体