pTXB1 载体 分子生物学试剂

名称：pTXB1 载体 分子生物学试剂
编号：SV1412
规格：10μg
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
特性:
单柱纯化且无需使用蛋白酶
目的蛋白质不含来自载体的氨基酸
可融合到目的蛋白的 N 端或 C 端
重组蛋白的连接或标记
可分离有或无 N 端甲硫氨酸的蛋白
关于产品详细描述和 pTXB1 和 pTYB21 载体图谱，包括 MCS（多克隆酶切位点），请见目录 355-356 页。载体序列文件请联系我们咨询 查询。
概述:
IMPACT（Intein Mediated Purificaiton with an Affinity Chitin-binding Tag）试剂盒利用经改良过的蛋白剪接元件（内含肽）进行一步亲和纯化重组蛋白（图1）。该系统与其它蛋白融合表达系统的主要区别在于:无需蛋白酶作用，即可将重组蛋白与其亲和标签（Tag）分离。
IMPACT 试剂盒能够融合表达含有内含肽及几丁质结合结构域（CBD）的蛋白，融合标签可以融合到目标蛋白的 C 端（pTXB1）或 N 端（pTYB21）（图 2）。在硫醇试剂（如 DTT）的参与下，内含肽进行特异性的自我剪切，释放出目的蛋白。pTXB1 载体还可用于表达和纯化 C 端含硫脂键的蛋白，并用于内含肽介导的蛋白连接（IPL，图 3）。IPL 反应，即表达蛋白连接，可通过一种天然肽键将 N 端为半胱氨酸的多肽或蛋白和一段细菌表达出的 C 端硫脂键蛋白连接起来，此反应可用于蛋白标记或半合成。有关 IMPACT 系统和 IPL 的更多信息请联系我们咨询 查询。
pTYB21 的内含肽标签包含酿酒酵母（Sce）VMA1 内含肽和几丁质结合域融合在目的蛋白的 N 末端。
pTXB1 是大肠杆菌表达载体，携带有一个小的蛋白自剪切元件即来自 Mycobacterium xenopi gyrA 基因的 mini 内含肽［Mxe GyrA 内含肽，22 kDa］。蛋白自剪切元件经修饰后与来自芽孢杆菌（Bacillus circulans）的几丁质结合域（CBD）一起共同形成一个内含肽标签。该标签可与几丁质珠（S6651）结合。使用硫醇试剂（如 DTT）或 MESNA（2-mercaptoethanesulfonic acid）（后续连接用）诱导内含肽自我剪切并释放出目的蛋白。
iMPACT 试剂盒组成:
– 大肠杆菌表达载体:pTXB1、pTYB21 和 pMXB10 对照载体
– 几丁质珠:纯化融合蛋白的亲和基质（结合容量 = 2 mg/ml）
– 抗 CBD 单克隆抗体
– DTT 与 SDS 上样缓冲液

欲了解更多pTXB1 载体 分子生物学试剂的品Pai、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:

·Nt.AlwI切刻内切酶
编号：SV0801
英文名称：Nt.AlwI切刻内切酶
规格：2500U|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1:
BalbBuffer 3.1:
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam甲基化敏感。

·BsgI限制性内切酶
编号：SV0177
英文名称：BsgI Restriction Endonuclease
规格：250U|50U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer:
特性
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液 + SAM，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度
5,000units/ml。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项
该酶要获得活性需加入 SAM(随 酶提供)，没有 SAM 酶仅有 25% 活性。

·pGLuc Mini-TK 2 载体
编号：SV1660
英文名称：BsgI Restriction Endonuclease
规格：20μg
概述:
所有 GLuc 载体和质粒包含一个人源化的 Gaussia 荧光素酶编码序列，可以在哺乳动物细胞中进行表达。
克隆载体:
pGLuc-Basic 2 载体不含启动子；pGLuc Mini-TK 2 载体含有一小段启动子片段，来源:于单纯疱疹病毒（HSV）胸苷激酶，位于 Gaussia 荧光素酶编码序列上游。将启动子或增强子克隆进入两种载体的多克隆位点（MCS），便可进行启动子和增强子的活性测试。
pTK-GLuc 载体含有单纯疱疹病毒（HSV）胸苷激酶启动子，用于组成型表达 GLuc。在该载体的 GLuc 终止密码子和多聚腺苷酸信号之间包含一段 MCS。被克隆进入 3´ UTR 的序列将成为 GLuc mRNA 的一部分。RNAi 或 miRNA 靶位点等序列可插入 GLuc 的 3´ 非翻译区，以评价 RNAi 或 miRNA的靶序列。
另外，所有的载体（pSV40-GLuc 对照质粒除外）均携带有一个新霉素（Neomycin）抗性标记，用以产生稳定的转染细胞系。
对照质粒:
pCMV-GLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒（CMV）启动子，可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-GLuc 2 可以在单独转染实验或与其它报告载体联合使用中作为阳性对照。
pSV40-GLuc 对照质粒在猿猴病毒 40（SV40）启动子控制下组成型表达 GLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。
来源:
GLuc 载体和对照质粒经过标准质粒纯化程序，分离自 E. coli 菌株 ER2272。
浓度:
500 μg/ml。


pTXB1 载体 分子生物学试剂