北京百奥莱博专业生产销售5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 蛋白质研究,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 蛋白质研究
品Pai:百奥莱博
规格:2ml
产地:国产|进口
编号:SY0349
本品用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的空间结构,消除了蛋白结构之间的差异。因此,电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
注意事项
1) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2) 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
3)5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液必须完全溶解后再使用。
操作方法
1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×SDS-PAGE上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4 μl蛋白样品加入1 μl 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
4.冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
储存条件:-20℃,有效期一年。
更多有关5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 蛋白质研究的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·考马斯亮蓝G250
编号:SY0300
英文名称:Coomassie Brilliant Blue G250
规格:10g
考马斯亮蓝是两种相似三苯甲烷染料的总称,有G250和R250两种,结构上前者比后者多了2个甲基,命名上 “G”为Green 的缩写,因G250的蓝色染料泛浅绿色;命名上“R”为Red的缩写,因R250的蓝色染料呈微红色调;“250”表示考马斯亮蓝的纯度。生化实验中常将考马斯亮蓝用于蛋白定量和蛋白电泳中蛋白染色。工作原理是:通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。
考马斯亮蓝R250更多用于电泳蛋白的染色,染色灵敏度比氨基黑高5倍,可达0.1µg蛋白。但是染色背景比较深,需要褪色后才能进行蛋白条带的观察。考马斯亮蓝G250对蛋白胶染色的灵敏度相对较差,检测到0.5µg蛋白。但是因其在三氯乙*(代'酸')中不溶而以胶体形式存在,选择性的和蛋白质结合形成复合物,染色迅速,着色深的蛋白质条带数秒内可以显现出来,约45min后着色Z深。而且染色背景低,不需要脱色即可进行蛋白条带的观察。因此,非常适合对电泳凝胶蛋白的快速定性分析。
考马斯亮蓝G250较多的用于溶液体系中蛋白的定量分析,即 Bradford蛋白结合检测法(Bradford protein-binding assay),此方法利用的就是G250与蛋白质结合的特性,Bradford试剂(也就是酸化的G250溶液)为阳离子,主要为双质子化,溶液为红色,其吸收波长(Amax)为470 nm。当与蛋白稳定结合后,G250以阳离子,非质子化的形式存在,溶液变为蓝色,吸收波长迁移到595 nm。蓝色阳离子形式染料的量与样本中蛋白的量成正比,因此通过直接测定595nm的吸光度来反映蛋白量。此法的优点在于G250与蛋白质结合所需的时间较短(约2min左右),且结合的G250-蛋白质复合物室温下约1h内保持稳定。反应灵敏度高,是一种非常常用的微量蛋白快速定量方法。
产品性质:
中文别名:酸性蓝90;考马斯亮蓝G;康美赛蓝G250
英文别名:Acid blue 90 Coomassie Brilliant Blue G
CAS:6104-58-1
分子式:C47H48N3NaO7S2
分子量:854.02
外观:蓝色至红色结晶粉末
溶解性:微溶于水,Z好先溶于甲醇或者乙醇。
储存条件:室温
结构式:
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 蛋白质研究
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