ERSE-Luc报告基因慢病毒颗粒供应

名称：ERSE-Luc报告基因慢病毒颗粒供应
产地：国产|进口
规格：50μl×4管; 2×10e7TU/ml
编号：SY0150
英文名：Lentivirus ERSE Luciferase Reporter
品Pai：百奥莱博
ERSE报告基因慢病毒是用于检测ERSE转录活性水平为目的的报告基因慢病毒颗粒。ERSE充当一个顺式作用元件调节内质网应激反应的转录应答。ERSE是包含NF-Y/CBF 和YY1转录因子结合位点的三重核苷酸序列。内质网应激反应元件结合因子（ERSF）复合体也是与ERSE核苷酸序列相互作用的。内质网应激在一些多发性疾病中具有关键的作用。

ERSE报告基因慢病毒主要用于检测ER Stress信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分子等。

pGMLV-ERSE-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒载体的多克隆位点插入了多个ERSE结合位点，可以高灵敏度地检测ERSE的激活水平。采用慢病毒作为报告基因的优点在于它能够感染多种难感染的细胞，比如原代细胞，干细胞，神经元细胞等。而且慢病毒能够将外源基因插入细胞基因组内，实现稳定转染。
质粒图谱



使用说明
ERSE报告基因慢病毒颗粒采用慢病毒转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒检测。

注意事项
1）病毒操作时Z好使用生物安全柜，如使用普通超净工作台操作病毒，请不要打开风机。
2）病毒操作时请穿实验服，带口罩和乳胶手套。
3）操作病毒时必须特别小心，不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染，立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。
4）用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤：拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前，用70%乙醇清理实验台。
5）病毒操作完成后，用肥皂清洗双手。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-80℃。

欲咨询购买ERSE-Luc报告基因慢病毒颗粒供应，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供Z全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·RIPA裂解液(弱)
编号：SY0315
英文名称：RIPA lysis buffer (Weak)
规格：100ml
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

本品为较为温和的裂解液（即RIPA裂解液（弱）），含有sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种YZ剂，可以有效YZ蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

注意事项

1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

使用说明：

(一) 细胞样品

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。


ERSE-Luc报告基因慢病毒颗粒供应