SY0294型耐热逆转录酶II价格厂家

名称：SY0294型耐热逆转录酶II价格厂家
品Pai：百奥莱博
编号：SY0294
英文名：Reverse Transcriptase II
规格：2000U
产地：国产|进口
Reverse Transcriptase（第二代耐热逆转录酶）是Reverse Transcriptase（代耐热逆转录）的升级产品，是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上通过体外分子进化技术获得的全新耐热逆转录酶。与上一代相比，进一步大幅提高了热稳定性，50℃下半衰期超过240min，并长时间耐受55℃高温且保持稳定，非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。此外，增加了多个突变位点，进一步增强了模板亲和力和行进性，大幅提升全长cDNA的合成能力，可获得长达20 kb的cDNA。另外，对于常见的逆转录YZ物具有更高的耐受度，非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。

活性定义：以Poly(rA) Oligo(dT)为模板/引物，在37℃，10min内，掺入1 nmol的dTTP为酸不性溶物质所需要酶量定义为1个活性单位（U）。

质量控制
核酸外切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在37 ºC下孵育1h，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37 ºC下孵育1h，DNA的电泳谱带不发生变化。
RNase残留检测：200 U本品和1 μg小鼠肝脏总RNA在37 ºC下孵育1h，RNA电泳谱带不发生变化。
功能检测1：逆转录体系中加入200 U本品，以100 pg Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23为引物，50 ºC反应30min。取10% cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。
功能检测2：逆转录体系中加入200 U本品，以500 ng Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23为引物，55 ºC反应45min。取10% cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。
功能检测3：逆转录体系中加入200 U本品，以1 pg-1 μg Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23VN和Random Hexamers为引物，测试qRT-PCR 性能。以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线，R2>0.990，斜率在-3.20到-3.60之间。

准备工作
1. 防止RNase污染：请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free。
2. 引物选择：
2.1 后续实验为PCR
a, 如果模板为真核生物来源，一般情况下Oligo dT18，与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对，可获得产量的全长cDNA。
b, 基因特异性引物 (GSP)的特异性。但有些情况下，用于PCR反应的GSP无法有效引导链cDNA合成。这时，可改用Oligo dT18或Random hexamers重新进行逆转录。
c, Random hexamers特异性，所有RNA，包括mRNA, rRNA, tRNA均可以作为Random hexamers的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高，或者模板为原核生物来源，使用Oligo dT18或基因特异性引物 (GSP)无法有效引导cDNA合成时，可使用Random hexamers为引物。
2.2 后续实验为qPCR
a, 将Oligo dT18与Random hexamers混合使用，可使mRNA的各个区域均能以相同效率引发cDNA合成，有助于提高定量结果的重复性。

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·牛饱和铁转铁蛋白
编号：SY0458
英文名称：Bovine Transferrin, HOLO
规格：100mg
饱和铁转铁蛋白（holo transferrin）持续地释放铁离子，并形成脱铁转铁蛋白(apo transferrin)。研究表明，饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是Z有效的形态。对于杂交瘤，黏连细胞和悬浮细胞系，在细胞培养过程中，应保持培养基中转铁蛋白浓度在0.5-100μg/ml。针对不同的细胞系，需要选择Z合适的浓度。

Bovine Transferrin（牛转铁蛋白）是一种广泛使用的生物可利用铁来源，细胞和组织培养中重要的促生长营养物。采用新西兰来源的牛血浆，利用亲和色谱层析技术制备而得，保证了产品的高纯度、蛋白完整性、无辛酸残留及提取过程无热或溶剂引起的变性效应，符合ISO质量体系，确保了高质素的产品安全标准。

Bovine Transferrin（牛转铁蛋白）以高纯度、热处理、冻干粉状态提供，并有脱铁（apo）或饱和铁（holo）两种形式。

转铁蛋白冻干粉需要保存在冷藏状态下，使用之前再溶解。一般用PBS或者纯水在室温下将转铁蛋白冻干粉溶解成储液，浓度为2 mg/ml，然后用无菌滤膜进行过滤，滤液可在无菌条件下4℃保存5-10天。

英文别名：Serum transferrin; beta-1-Metal-combining protein; Siderophilin
来源：牛血浆
含铁量：不少于1000 ppm
分子量：约76,000-81,000
外观：浅红色冻干粉
纯度：≥95%（w/w总蛋白）
溶解性：溶于水（10 mg/ml），在20-25℃完全溶解约20min
储存条件：4℃


SY0294型耐热逆转录酶II价格厂家