细胞转染质粒提取试剂盒厂家

名称：细胞转染质粒提取试剂盒
编号：ALH083
规格：20次
产地：国产|进口
本试剂盒适用于中量高纯或者转染级质粒制备和BAC/PAC大型质粒制备。用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA，采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂，只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质，获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右，得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作，方法简单，不需特殊设备，无需过柱，不用酚氯*(代＇仿＇)抽提；基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒，不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA，对质粒损伤小，即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒，只要碱裂解法能够提取，就可以有效纯化。可选择任意小体积溶解质粒，浓度可高达3μg/μl。

试剂盒组份(20次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75
溶液P1—————————————65ml
溶液P2—————————————50ml
溶液PⅢ-————————————50ml
杂质清除剂A-——————————1.5ml
杂质清除剂B-——————————15ml
内毒素清除剂——————————5ml

试剂盒特点：
1.不需要使用有毒的苯酚，氯*(代＇仿＇)等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从50-70 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取100μg -250μg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高，浓度高，超螺旋比例高，纯度好，可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低（<0.1 EU/μg DNA），可直接应用于细胞转染。

注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大质粒时操作动作要轻柔，应该使用剪大了开口的吸头，防止机械剪切对DNA 的损坏。
3. DNA 沉淀液沉淀离心后，可能看不到明显沉淀。如未见沉淀，担心DNA 丢失，可保留上清液，待完成全部操作后电泳鉴定，以确定是否获得终产物（数百微克DNA 离心沉淀在管的侧壁上，可能无法看到明显团块）。
4. 得到的质粒DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1 相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2 条或者多条DNA 条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过95%。
5. 质粒DNA 确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道确切大小。

储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：无内毒素质粒中量提取试剂盒|细胞转染用质粒制备试剂盒|高纯度质粒重量提取试剂盒|细胞转染质粒提取试剂盒|无内毒素培养菌质粒提取试剂盒