北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)折扣价在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)折扣价
产地:国产|进口
规格:100次
编号:YT309
英文名:Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8
品Pai:百奥莱博
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
试剂盒组分:
SOD检测缓冲液——————70ml
WST-8——————————800μl
酶溶液——————————100μl
反应启动液(40X)——————60μl
超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,YZ百分率达不到等,从而使检测的灵敏度和精确度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C其氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,并且不太适合大批量样本的检测。
目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图,WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),该反应步骤可以被SOD所YZ。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。
基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO:xanthine oxidase。
WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时,YZ百分率可以接近,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时,对于检测结果仍无显著影响。
注意事项:
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液,否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
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·FoxO4抗体
编号:YT777
英文名称:anti-FoxO4 antibody
规格:>20次
本抗体是用人工合成人FoxO4一段多肽经过适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本FoxO4抗体识别的是总FoxO4(total FoxO4),可以检测内源性的FoxO4蛋白水平。它对磷酸化的FoxO4也敏感,但检测未磷酸化的FoxO4效果更好。
转录因子Forkhead家族蛋白与横纹肌肉瘤、急性白血病等肿瘤发生有关。该转录因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和FoxO3a,和线虫同源蛋白DAF-16的序列高度相似,介导了包括IGFR1,PI3K和Akt在内的信号转导通路。Forkhead家族蛋白激活后,可通过促进细胞周期阻滞(cell cycle arrest)和细胞凋亡而YZ肿瘤。高表达Forkhead家族蛋白会导致细胞周期YZ蛋白p27Kip1的激活。同时Forkhead家族蛋白在TGF-β介导的p21CIP1上调中起作用,而该过程又可被PI3K所负调控。胰岛素等诱导的增殖信号会导致FoxO蛋白通过Akt介导的Thr24、Ser256和Ser319位点的磷酸化,导致FoxO从细胞核中转运到细胞浆中,从而YZ其转录活性。FoxO还可以被Sirt1、p300等进行乙酰化调控。
FoxO4和FoxO1和FoxO3a相似,都和急性白血病有关,都可以被Akt磷酸化修饰而从细胞核转运到细胞浆中而丧失基因转录活性。FoxO4有三个磷酸化位点,Thr32,Ser197和Ser262。Akt介导的磷酸化和Sirt1等介导的去乙酰化对FoxO4起重要调控作用。FoxO4可结合并YZmyocardin,从而YZ平滑肌细胞分化。FoxO4还可以下调低氧反应中的关键蛋白HIF-1α的蛋白水平。
产品组份:
FoxO4抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:人FoxO3a Glu50附近一段多肽
宿主:兔
用途:WB
交叉反应性:人,小鼠,大鼠,猴
FoxO4分子量:~65kD
推荐稀释比例:WB(1:1000)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京现货总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)折扣价
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