非酶 RNA 清除剂 2.01.5mL特点导致核酸降解的常见非酶因素原因:
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
非酶 RNA 清除剂 2.01.5mL特点产品介绍:
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/2/636231863006970916329.jpg)
使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟,弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过 25 mL,否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染,Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有 DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入 1mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。
特点:
1. 常温保存时间长达半年,方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛,适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠,提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳(因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的,80801B 包装含 200 只专用拭子)。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout(CAT#:80801)提取其 DNA,从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存,Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。
大鼠阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1α(SCNN1α)ELISA试剂盒 ,英文名: SCNN1α ELISA Kit
Human interleukin 1 alpha 1 alpha (IL-1 alpha) ELISA Kit 人白介素1α1α(IL-1α )ELISA试剂盒
BovineAcetoaceticacid,ACACELISAKit 牛乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforCFHELISAKit大鼠补体因子H规格:48T/96T
细胞总胆固醇酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
RatAquaporin2,AQP-2ELISAKit大鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠别孕烯醇酮(AP)ELISA试剂盒 ,英文名: AP ELISA Kit
Rat estrogen receptor (ER) ELISA Kit 大鼠雌激素受体(ER)ELISA试剂盒
RatBeta-HydroxybutyricAcid,β-OHBELISAKit 大鼠β羟丁酸(βOHB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
COXIgGI柯萨奇病毒IgGⅠ(间接法二步法)
细胞乙醇脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒20次
RatCollagenTypeⅢ,ColⅢELISAKit大鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒 ,英文名: TSH ELISA Kit
Mouse collagen type N N-terminal peptide (NTX) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠CXCR4(mouse CXCR-4) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforLH(Mouseluteotropichormone)ELISAKit小鼠促黄体激素规格:48T/96T
通用型HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次
ELISAKitAChRab猴子乙酰胆碱受体抗体规格:48T/96T
QBC-939, 人胆管癌细胞 Human
雪羊皮肤细胞;SSHS1
HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)
仓鼠源细胞 管癌细胞,T-47D细胞 B6YH4细胞,杂交瘤细胞支原体阳性
人扁桃体上皮细胞HTEpiC
SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人细胞裂解 (阳性
CM-M091小鼠成骨细胞完全培养基100mL
TNFSF12 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 人 TNFSF12 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
成骨细胞培养基ObM-prf
HeLa229细胞,人宫颈癌细胞(HPV-18永生化细胞) 小鼠垂体瘤细胞,GT1-1细胞 成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
HBE(人支气管上皮样细胞) 5×106cells/瓶×2
hMSC-AT Pellet 人体脂肪组织的间质干细胞团块 > 1 mi
ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0408NEC(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2
人脊髓星形胶质细胞微小RNAHA-sp miRNA5 μg
MCF-7(OLD)细胞,人癌细胞 小鼠肾癌细胞,RenCa细胞 HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞
MDA-MB-468(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC Growth Medium 2single donor Pellet #N/A > 1 mio.cells 软骨细胞培养基CM
CL-0408NEC(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2
ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人脊髓星形胶质细胞微小RNAHA-sp miRNA5 μg
MCF-7(OLD)细胞,人癌细胞 小鼠肾癌细胞,RenCa细胞 HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞
MDA-MB-468(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC Growth Medium 2single donor Pellet #N/A > 1 mio.cells 软骨细胞培养基CM
非酶 RNA 清除剂 2.01.5mL特点Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 间充质干细胞软骨分化培养基无诱导剂(即用型) 100ml
人海马趾星形胶质细胞cDNAHA-h cDNA
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
Hep3B2.1-7细胞,人肝癌细胞 人髓母细胞瘤细胞,D341Med细胞 ZG仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纤维 5×106cells/瓶×2
小鼠色素瘤细胞;B16-F1