慢病毒转染稳转细胞系构建_详细资料

产品信息 服务名称：慢病毒转染稳转细胞系构建提供商：艾柏森生物 步骤服务内容服务描述 1 实验方案设计根据客户需求以及客户提供的数据设计实验方案 2 慢病毒过表达质粒载体的构建设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，使用PCR从模板中调取目的基因CDS区连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。 3 慢病毒干扰质粒载体的构建合成siRNA对应的DNA颈环结构，退火后连入慢病毒干扰质粒载体 4 慢病毒载体的包装与浓缩纯化制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒，三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提，共转染细胞，转染成功后更换为完全培养基，培养后分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒 5 效率检验目的细胞感染与过表达效率验证 结果交付交付慢病毒转染的稳转细胞系（冻存）；构建病毒过程中所用到的病毒载体、质粒等 实验报告上述各步骤详细实验报告，包括实验所用试剂耗材等信息、各种材料相关信息；各步骤实验结果等。

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步骤	服务内容	服务描述
1	实验方案设计	根据客户需求以及客户提供的数据设计实验方案
2	慢病毒过表达质粒载体的构建	设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，使用PCR从模板中调取目的基因CDS区连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。
3	慢病毒干扰质粒载体的构建	合成siRNA对应的DNA颈环结构，退火后连入慢病毒干扰质粒载体
4	慢病毒载体的包装与浓缩纯化	制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒，三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提，共转染细胞，转染成功后更换为完全培养基，培养后分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒
5	效率检验	目的细胞感染与过表达效率验证
	结果交付	交付慢病毒转染的稳转细胞系（冻存）；构建病毒过程中所用到的病毒载体、质粒等
	实验报告	上述各步骤详细实验报告，包括实验所用试剂耗材等信息、各种材料相关信息；各步骤实验结果等。