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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖一步法RT-PCR试剂盒特价促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:一步法RT-PCR试剂盒特价促销
编号:JN0006
规格:200次
英文名:BalbScript One-Step RT-PCR UltraMix
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒是基于本公司BalbScript Reverse Transcriptase反转录酶(Cato: JN0011)和HotStart Taq DNA聚合酶(Cato: JN0023),对缓冲液体系进行优化使反转录酶和聚合酶同时发挥功效,具有方便、快速、灵敏度高、重复性好等特点。该试剂盒能以动物、植物和微生物的总RNA或mRNA为模板,cDNA合成和PCR反应在一个管中进行,反转录结束后可直接进行PCR循环而不用增加额外的步骤;同时可对低至1fg的总RNA进行扩增,有助于大量样品的处理并减少污染机会。
产品特点:
1、效率高,可反转录GC含量高,二级结构复杂的RNA模板。
2、独特的缓冲体系使反转录酶和聚合酶同时发挥功效。
3、操作简单,可限度的避免污染。
试剂盒组成:
组份 | JN0006-200次 |
BalbScript RT Enzyme Mix | 200μl |
2×BalbScript One-Step RT-PCR UltraMix | 1ml×2 |
RNase Free Water | 1ml×2 |
注意事项:
1、本试剂盒PCR扩增延伸时间为1kb/min,客户可根据具体片段长度进行延伸时间的调整。
2、通常情况,28~30个循环可达到扩增,对于低拷贝目的基因的检测,可将循环数增加到40个。
3、如果同时操作多个样品,建议先在冰上先配制预混液,然后再分装到各个反应管中,加入模板启动反应。
4、反应出现目标条带拖带,系模板浓度过高或特异引物浓度不适等原因所致,可对模板及引物浓度等进行调整;反应出现杂带,可对退火温度进行调整,或重新设计特异性高的引物。
5、本试剂盒只需使用特异性反转录引物,无需使用Random Primer和OligodT Primer等进行反转录反应。
6、为了保证反应的正常进行,需使用高质量的RNA模板。
操作方法:
1、将RNA模板、引物、2×BalbScript One-Step RT-PCR UltraMix,BalbScript RT Enzyme Mix和RNase Free Water溶解并置于冰上备用。
2、配制以下
反应体系: 组分 | 体积 |
模板RNA | 0.1ng-5ug |
BalbScript RT Enzyme Mix | 1μl |
2×BalbScript One-Step RT-PCR UltraMix | 10μl |
上游引物,10μM | 0.5-1μl |
下游引物,10μM | 0.5-1μl |
ddH2O | 至20μl |
3、轻轻混匀后短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
4、设置反应程序:
温度 | 时间 | 循环数 |
42℃ | 5min/500bp | |
95℃ | 5min | |
95℃ | 20秒 | 25-30次循环 |
57℃ | 20秒 |
72℃ | 根据产物长度调整,60秒/kb |
72℃ | 5分钟 | |
4℃ | 保温 | |
应用实例:
图例一)小鼠胚肝总RNA使用百奥莱博一步法RT-PCR扩增。
泳道1-9总RNA量分别为1ng-0.01pg,10倍梯度稀释,目的基因:GAPDH,扩增灵敏度可达到0.1pg。
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·重组人转录起始因子IIB(TFIIB)
编号:JN0696
英文名称:Recombinant Human Transcription Initiation Factor IIB
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成,目的基因编码的Met1-Leu316在N端带有GST标签。
TFIIB质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
TFIIB制剂:冻干品
TFIIB保存:
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。
TFIIB复溶:
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。
关于TFIIB:
Transcription Initiation Factor IIB (TFIIB) is an essential factor for transcription by RNA Polymerase II. TFIIB localizes to the nucleus where it forms a complex (the DAB complex) with transcription factor IID and IIA. TFIIB plays a role as a bridge between IID, which initially recognizes the promoter sequence, and RNA polymerase II. TFIIB is involved in the selection of transcription start site.
·重组小鼠IL-2 RA
编号:JN1403
英文名称:Recombinant Mouse Interleukin-2 receptor subunit alpha
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成,目的基因编码的Glu22-Lys236在C端带有Fc标签。
IL-2 RA质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
IL-2 RA制剂:冻干品
IL-2 RA保存:
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。
IL-2 RA复溶:
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。
关于IL-2 RA:
The interleukin 2 receptor alpha (IL2RA), also called CD25, is a type I transmembrane protein that presents on activated T cells, activated B cells, some thymocytes, myeloid precursors, and oligodendrocytes. IL2RA is a member of cytokine receptors family that utilizes the common gamma chain subunit (γc). IL2RA is expressed in most B-cell neoplasms, some acute nonlymphocytic leukemias, neuroblastomas, and tumor infiltrating lymphocytes. IL2RA associates with IL2RB (CD122) to form a heterodimer that can act as a high-affinity receptor for IL-2.
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·酯酰辅酶A合成酶
编号:JN0147
英文名称:Acyl-CoA Synthetase
规格:50U
外观:白色冻干粉末
来源:微生物
酶委员会编号:EC 6.2.1.3
CAS#:9013-18-7
储存温度:-20℃
比活:≥ 8U/mg protein
活性定义:在pH7.5,温度为37℃的条件下,1unit每分钟可催化1μmol的脂肪酸生成乙酰CoA。
分子量:63 kDa (SDS-PAGE)
等电点:7.5
米氏常数:1.4×10-5M(oleic acid);1.9×10-4M(CoA);1.9×10-5M(ATP)
Z适pH:7.5
Z适温度:37℃
pH稳定性:6.5~7.5 (25℃, 18hr)
温度稳定性:<45℃ (pH7.5, 10min)
YZ剂:Ag+,Hg2+
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温馨提示:不可用于临床ZL。