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名称:一步法RT-qPCR试剂盒(SYBR Green) 促销
编号:JN0051
规格:100次
英文名:One-Step qRT-PCR UltraMix(SYBR Green)
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本制品是采用SYBR Green嵌合荧光法进行qRT-PCR的专用试剂。制品中已经将反转录酶、DNA聚合酶、反应用Buffer、dNTPs、SYBR Green等试剂预混在一起,是一种2×浓度的预混型试剂,反应液的配制十分方便简单。
本制品采用HotStart Taq并结合特别配置的缓冲体系,能有效YZ非特异性反应,从而在更广的范围内进行准确定量。
本制品能以动物、植物和微生物的总RNA或mRNA为模板,cDNA的合成与PCR反应在一个管中进行,反转录结束后可直接进入PCR循环而不需额外步骤。本制品配有不同浓度的ROX Reference Dye,用于不同仪器校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
产品组成:
组份 | 体积 |
2×BalbScript SYBR One-Step qRT-PCR UltraMix | 1ml |
BalbScript RT Enzyme Mix | 100μl |
RNase Free Water | 1ml×2支 |
ROX Reference Dye I | 200μl |
ROX Reference Dye II | 200μl |
产品特点:
高特异性:采用特殊工艺制造的热启动HotStart Taq DNA聚合酶,大大提高了PCR扩增的特异性。
GX:百奥莱博精心配制的RealTime PCR专用2×UltraMix,具有更高扩增效率和灵敏度。
使用建议:
1、原则上-20℃避光保存。如果持续使用,可在4℃内进行短期保存,但此时须遮光,建议使用遮光箱或用添附的铝袋进行保存。
2、请将体系上下颠倒混匀,动作轻柔,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头及Microtube等,尽量避免污染。
3、一般为了增加敏感度及扩增效率且YZ非特异性反应,扩增的目标序列越短越好,建议设计在200bp以下。另外,GC cluster(特别是3´末端)等会引起引物二聚体等非特异反应,一般不建议采用,特别是Intercalater Assay受非特异性反应影响较大,更需注意。
常用反应体系(20μl)
成分 | 体积 |
2×BalbScriptSYBR One-Step qRT-PCR UltraMix | 10μl |
BalbScriptRT Enzyme Mix | 1μl |
上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
模板 | 1-2μl |
RNase Free Water | 至20μl |
常用PCR循环:
两步法扩增程序(推荐): |
42℃ | 30min |
94℃ | 5min |
35-40次循环 | 95℃,15s 60℃,1min |
三步法PCR扩增程序(引物Tm值较低或其他原因): |
42℃ | 30min |
94℃ | 5min |
35-40次循环 | 95℃,15s 57℃,20s 72℃,30s |
储存条件:-20℃
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温馨提示:不可用于临床ZL。