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百奥莱博专业生产销*(代"售")2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)现货供应,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)现货供应
编号:QN0971
规格:1ml|5ml
品Pai:百奥莱博
产地:北京
PCR MasterMix包含三种酶(Taq,Pfu,Taq plus),每种酶对应着两种PCR MasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCR MasterMix。
Taq:扩增效率的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。
Pfu:目前保真度的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。
Taq Plus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。
染料PCR MasterMix反应完后可以直接电泳检测。
别名:2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)
英*(代"文")名称:2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)
储存条件:-20
性状:液体
2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)现货供应正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·对硝基*(代"*")-N-乙酰-β-D-*基葡萄糖苷
编号:QN0840
英*(代"文")名称:PNP-Nag
规格:100mg
CAS号:3459-18-5
·L-瓜*酸
编号:QN0302
英*(代"文")名称:L-Citrulline
规格:25g
本品仅能用于科研实验,L-瓜*酸主要有以下功效:
1、提高免疫系统功能。
2、维护关节运动的机能。
3、平衡正常的血糖水平。
4、含丰富的抗氧化吸收有害的自由基。
5、帮助保持胆固醇的正常水平。
6、维护建康的肺功能。
7、提高脑力清晰度。
8、降低压力和克服沮丧情绪。
9、提高建康的性生活功能。
别名:N5-*基羰基-L-乌*酸
CAS号:372-75-8
分子式:C6H13N3O3
分子量:175.19
储存条件:0~5℃
纯度:≥99%
·丙*(代"酮")酸激酶
编号:QN0468
英*(代"文")名称:Pyruvic kinase
规格:1KU
丙*(代"酮")酸激酶仅用于科研实验。丙*(代"酮")酸激酶是糖酵解途径中的一种酶,催化磷酸烯醇丙*(代"酮")酸酯和ADP转变成丙*(代"酮")酸和ATP的磷酸基转移酶。
CAS号:9001-59-6
储存条件:2−8℃
酶活:200u/mg
性状:白色冻干粉
·潮霉素B
编号:QN0023
英*(代"文")名称:Hygromycin B
规格:1g
本品常用做蛋白质合成YZ剂,可用于植物细胞培养等生化研究。本品是潮霉素B干粉,用于细胞培养实验溶解后过滤CJ。推荐溶剂水,PBS溶液。
CAS:31282-04-9
储存条件:-20℃
别名:湿霉素乙;效高素;潮霉素B干粉
效价:≥950U/mg
潮霉素B是由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素,通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而YZ蛋白合成,从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳动物真核细胞。
大肠杆菌来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),编码潮霉素B磷酸转移酶,将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物,从而起到作用。针对这一原理,潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外,由于作用模式的差异,常与G418,Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂,因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,且具有YZ翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。
使用方法
1. 常用筛选浓度
注意:潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定筛选浓度。一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1)天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2)根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
终浓度(μg/mL) | 培养基体积(ml) | 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml) |
50 | 9.9 | 0.1 |
100 | 9.8 | 0.2 |
250 | 9.5 | 0.5 |
500 | 9.0 | 1.0 |
750 | 8.5 | 1.5 |
1000 | 8.0 | 2.0 |
3)第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果Z好。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,Z好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。
注意事项:
1)潮霉素B的抗性基因(hyg或hph)除了来自大肠杆菌之外,还发现于其他的菌株,包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。
2)本品为有毒化合物,避免与皮肤和眼睛接触,请小心操作。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)现货供应关键词:2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)
·兔抗亲合素
编号:QN0269
英*(代"文")名称:Rabbit anti-Avidin
规格:0.1ml
储存条件:-20℃
·胆固醇
编号:QN0727
英*(代"文")名称:Cholesterol
规格:100g|500g|1000g
本品常用在脑磷脂胆固醇絮状试验,制备合成维生素D和激素。
CAS号:57-88-5
分子式:C27H46O
分子量:386.65
纯度:≥99%
性状:一水合物为白色或浅黄色有珠光的片状结晶
溶解性:100mg/ml*仿,澄清无色或浅黄色溶液
储存条件:室温
·β-雌二醇
编号:QN0231
英*(代"文")名称:β-Estradiol
规格:1g
本品β-雌二醇是一种生化试验用试剂。
别名:雌素二醇;雌性二醇;求偶二醇;二羟基雌激素酮;雌甾二醇
CAS号:50-28-2
分子式:C18H24O2
分子量:272.38
储存条件:常温干燥
性状:白色或乳白色叶片状或针状结晶(乙醇溶液)
·*妥英*
编号:QN0011
英*(代"文")名称:Phenytoin Sodium
规格:25g|100g
CAS:630-93-3
分子式:C15H11N2NaO2
分子量:274.25
别名:大仑丁;大伦丁;地伦丁;二*乙内酰脲*;二*乙内酰脲;5,5-二*乙内酰脲*
·四氧嘧啶
编号:QN0572
英*(代"文")名称:Alloxan monohydrate
规格:5g
CAS号:2244-11-3
分子式:C4H2N2O4·H2O
分子量:160.08
储存条件:2~8℃
·湿润剂P-40
编号:QN0248
英*(代"文")名称:Nonidet TM P40 Substitute
规格:100ml
本品是湿润剂,非离子去污剂,是一种较温和的细胞裂解试剂,NP40平均分子量680。
别名:NP40
CAS号:9016-45-9
分子量:680
储存条件:RT
性状:浅色粘稠状液体
pH:5~8(5%水)
密度:1.06g/ml
贮存条件:密封阴凉干燥保存。
性状:液体,有吸湿性。在软水、硬水、盐、碱和酸性溶液中都很稳定。在贮存时可能变浑浊,但加热至40℃即能澄清。能与水混溶,溶液呈中性,溶于极性有机溶剂。有刺激性。是一种非离子型表面活性剂。清洁剂。润化剂。乳化剂。
生物学应用:
NP40是一种非离子型表面活性剂,是动物细胞常用的裂解液。在免疫沉淀中所用的抗体是识别构像的表位时使用NP40裂解液。如果抗体是识别线性抗原表位(如合成肽)则可使用强变性裂解液(如RIPA裂解液)。
2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)现货供应关键词:2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)
·甜菜碱
编号:QN0730
英*(代"文")名称:Betaine
规格:10g
本品常用作甲基供体,也可用作PCR增强剂。
别名:甜菜素;三甲铵乙内酯;甘*酸三甲胺内盐
CAS号:107-43-7
分子式:C5H11O2N
分子量:117.15
纯度:≥98%
性状:白色或类白色粉末
储存条件:2~8℃
·温度敏感型UNG酶 (TS-UNG)
编号:QN0376
英*(代"文")名称:Temperature Sensitive UNG
规格:100U
本品常用作甲基供体,也可用作PCR增强剂。
别名:甜菜素;三甲铵乙内酯;甘*酸三甲胺内盐
CAS号:107-43-7
分子式:C5H11O2N
分子量:117.15
纯度:≥98%
性状:白色或类白色粉末
储存条件:2~8℃
·土壤基因组DNA提取试剂盒
编号:QN0888
英*(代"文")名称:Soil Genomic DNA Extraction Kit
规格:50T|100T
本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生物DNA。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果,限度的保留了微生物DNA的多态性。
本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料,可GX专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA的产率,纯度较酚、*仿抽提法提高数倍。
使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。
储存条件:室温(15~25℃),有效期12个月,2~8℃保存时间更长。
·10×MOPS缓冲液
编号:QN1002
英*(代"文")名称:10×MOPS buffer
规格:100mL|500mL
MOPS属于生物缓冲剂,经常用于配制RNA 电泳缓冲液。主要由MOPS、乙酸*、EDTA 组成,经RNase free 处理,主要用于RNA 电泳。
别名:3-(N-吗啉基)丙磺酸
CAS:1132-61-2
分子式:C7H15NO4S
分子量:209.26
储存条件:RT
北京百莱博科技有限公司是核酸扩增(PCR)产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)现货供应。
温馨提示:不可用于临床ZL。