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柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)现货供应由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)等DNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)现货供应
品Pai:百奥莱博
规格:50次
编号:BTN130992
英文名:Yeast DNA Column extraction kit(Glass bead method)
酵母DNA提取是一个难题,因为酵母有很厚的细胞壁,比较难以破碎。本产品是液氮研磨法柱式酵母DNA提取试剂盒的姊妹产品,它利用玻璃珠法破碎细胞,主要用于从酵母细胞中提取DNA(液氮研磨法柱式酵母DNA提取试剂盒采用液氮研磨法破碎细胞,适用于从酵母菌丝体中提取其基因组DNA)。
产品特点:
1. 即开即用,提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援酵母DNA(注:文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源酵母DNA污染,用于提取酵母DNA往往会造成污染。这些文献可从本公司本产品介绍网页下方下载)。
3. 本方法提取一个样品只需要10余分钟,方便、快速和GX。
4.一次可以处理5mL的过夜酵母培养物,所得的基因组DNA OD260/OD280一般都在1.8左右,长度一般在20 kb左右,每mL菌液的DNA产率一般在1-3ug。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
酸洗玻璃珠,400 um | 25g |
溶液A | 25mL |
溶液B | 25mL |
溶液C | 75mL |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液 | 10mL |
使用手册 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,保存期为一年。
使用方法:1. 对菌液:取3-5mL过夜培养的酵母菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2. 对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的酵母菌落,转移到装有1mL水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3. 对孢子材料,一般取0.1g左右,直接加入到离心管中,然后进入下一步操作。
4.在材料中加入无菌水1mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
5.沉淀中加入500μL溶液A和0.5克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟。
6. 加入500μL的溶液B,涡旋震荡,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个5mL的干净的塑料离心管中。或者每管0.3mL,分别转移到2-3个1.5mL的干净的塑料离心管中。
7.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再第二次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。
8.在离心吸附柱中加入500μL通用洗柱液,12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液。
9. 重复上步操作一次。
10. 12000rpm空柱离心1分钟。
11. 加入50-100μL DNA洗脱液,室温放置1分钟以上,12000rpm离心1分钟,穿透液即为酵母DNA样品。
12. 为了得到更多的DNA样品,可以重复上步操作1-2次。
13. 所得DNA即可立即使用或放冰箱长期保存。
更多有关
柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)现货供应的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒
编号:BTN81107
英文名称:Endotoxin-free plasmid DNA large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是整合大提质粒DNA提取试剂盒和菌体内毒素清除剂两产品而成。菌体内毒素清除剂是我司推出的产品,在质粒提取前就把细胞壁上的内毒素清除掉,彻底避免了目前通用的先提取DNA+内毒素混合物,再从中纯化质粒DNA的弊端。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点:1. 操作简单,只在经典的柱式质粒DNA提取前,增加菌体内毒素清除一步。
2. 去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。
3.质粒丢失少,产率只比柱式质粒DNA提取试剂盒低5-10%,效果好于先提质粒DNA,再用液相内毒素清除剂处理的方法。
4. DNA可以直接用于转染等实验。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
菌体内毒素清除剂 | 200ml |
溶液A | 25ml |
溶液B | 25ml |
溶液C | 35ml |
RNase A溶液(10mg/mL) | 300μl |
吸附柱活化液 | 12.5ml |
大提离心吸附柱 | 5套 |
通用洗柱液 | 100ml |
DNA洗脱液3.0 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:RNase A溶液需4℃或-20℃保存,其余成分可室温保存,如有沉淀可加热溶解后再使用。
使用方法:1. 用50mL塑料离心管收集不超过40mL的E.coli 饱和菌液,5000rpm离心5-10分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2. 加入10mL菌体内毒素清除剂,温和混匀后5000rpm离心5-10分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 重复上述操作3次,得到的菌体将丢失了绝大部分细胞表面的内毒素。
4. 往细菌沉淀中加入5mL溶液A(DY次使用时需要将RNase A溶液全部加入并混合均匀,未用完的部分放4℃保存),充分振荡悬浮。注意:充分重悬细胞沉淀(无块状物)对于获得高的质粒产量十分重要。
5. 加5mL溶液B,温和翻转10 余次至透明。若混合液不透明,应减少细菌的用量或室温放臵5-10分钟直到裂解液变透明。注意: 避免剧烈振荡,否则细菌基因组DNA 将断裂为小片段,与质粒难以分离,污染质粒DNA。
6. 加入冰浴的7mL溶液C,颠倒混匀,冰上放臵10分钟。混合物中将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
7.在等待期间,活化离心吸附柱。在离心吸附柱中加入2.5mL活化液,套上收集管后室温放臵2分钟,然后5000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果不活化,质粒得率将低20-40%左右。
8. 6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力强,离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
9. 将上步得到的上清液移入到大提离心吸附柱中,放入50mL收集管中。室温放臵5分钟左右以便让质粒DNA跟膜结合。
10. 6000rpm离心5分钟,质粒DNA 将与大提离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
11. 将10mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静臵2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
12. 重复上步一次。
13.室温6000rpm 空甩5分钟,弃穿透液。注意:此步很重要,不能跳过,否则残留乙醇会影响后续实验。
14. 将大提离心吸附柱放入一个干净的50mL塑料离心管中,加0.5mL DNA洗脱液3.0(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳),室温静臵2分钟后6000rpm离心5分钟,收集液即是质粒DNA溶液。
15. 重复上步3-4次可洗脱更多的质粒DNA。DNA 洗脱液3.0 不够可以用TE或超纯水替代。
16. 合并所得质粒DNA,立即使用或-20℃储存。
注意事项:1.细菌培养时间一般为12-16小时,但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
2.注意溶液A:溶液B:溶液C的比例为5:5:7。若细菌量增大,需按比例放大这些溶液的使用量。
3.随菌体增多应延长溶液B的作用时间,直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
4.加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片,离心后应避免带入到后续处理中。
5.通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次,否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
6.质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。一般1.5mL 过夜培养菌体可收获约10μg高拷贝质粒。
7.纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常,未分开的环套质粒,易被误判为基因组DNA。
柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)现货供应关键词:玻璃珠法,柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法),Yeast DNA Column extraction kit(Glass bead method),BTN130992
·非冻型尿液DNA保存液
编号:BTN90315
英文名称:DNAhold Urine RNA non-freezing preservation
规格:100mL
本品在室温条件下长期保存用于DNA提取的尿液样品保存液。它能够GX、长期保证DNA分子的完整性。
产品特点:1. 保存时间长,可室温保存尿液DNA长达六个月,尤其适合于野外尿液样品采集。
2. DNA完整性好,纯化后长度在20-50 Kb之间。
3. DNA无化学修饰,提得的DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
4. 能防止尿液在4℃结晶。
5. 安全可靠,本产品无毒无害。
6. 使用简单,直接把新鲜的尿液样品与本产品混合即可。
储存条件:室温运输及保存,有效期两年。
使用方法:(以DNA提取为例)
1. 迅速将尿液与本产品按10:1的比例混合。
2. 常温闭光保存直到使用。
3. 使用常规液体DNA提取方法提取DNA即可。推荐使用柱式尿液DNA提取试剂盒(BTN90314),使用柱式尿液DNA提取试剂盒提取本产品保存的尿样,兼容性好,提取效率更高。
4. 提取得到DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)现货供应关键词:玻璃珠法,柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法),Yeast DNA Column extraction kit(Glass bead method),BTN130992
乙二*(代"胺")四乙酸二*锌盐 Carbazole 176736-49-5
ARB11368 人前列腺素D合成酶(PGDS)代做ELISA实验 Human prostaglandin d synthase,pgds ELISA KIT
ARB14227 鸡新城疫病毒抗体(NDV-Ab)ELISA检测服务
甲基环戊烯醇酮 Phosphoglucose isomerase 765-70-8
9039-53-6 尿激酶 Urolinase
Weil髓鞘染色液 4×50ml
ARB12847 小鼠内毒素(ET)ELISA代测服务 Mouse endotoxin,et ELISA KIT
113-24-6 Pyruvic Acid 丙*(代"酮")酸*
FMOC-L-*丙*酸 D-Proline methyl ester hydrochloride 35661-40-6
NF-213 羊抗人C5血清
ARB11500 人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(AFABP)尿液中含量检测 Human adipocyte fatty acid-binding protein,a-fabp ELISA KIT
DNaseⅠ(RNase free) 10KU
ARB11321 人胆固醇(C)Elisa定量检测 Human cholesterol ELISA KIT
BL1305 5×G250(蛋白定量专用)
ARB12878 小鼠丙二醛(MDA)Elisa方法检测 Mouse malondialchehyche,mda ELISA KIT
ARB11984 大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA代测服务 Rat gata binding protein 4,gata4 ELISA KIT
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温馨提示:不可用于临床ZL。