BTN130992型柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)销售

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN130992型柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)销*(代"售")，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN130992型柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)销*(代"售")
英文名：Yeast DNA Column extraction kit(Glass bead method)
产地：国产|进口
规格：50次
品Pai：百奥莱博
编号：BTN130992
酵母DNA提取是一个难题，因为酵母有很厚的细胞壁，比较难以破碎。本产品是液氮研磨法柱式酵母DNA提取试剂盒的姊妹产品，它利用玻璃珠法破碎细胞，主要用于从酵母细胞中提取DNA(液氮研磨法柱式酵母DNA提取试剂盒采用液氮研磨法破碎细胞，适用于从酵母菌丝体中提取其基因组DNA)。

产品特点：
1. 即开即用，提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2. 采用玻璃珠法破碎细胞，属于物理方法，远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好，也不容易带入外援酵母DNA(注：文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源酵母DNA污染，用于提取酵母DNA往往会造成污染。这些文献可从本公司本产品介绍网页下方下载)。
3. 本方法提取一个样品只需要10余分钟，方便、快速和GX。
4.一次可以处理5mL的过夜酵母培养物，所得的基因组DNA OD260/OD280一般都在1.8左右，长度一般在20 kb左右，每mL菌液的DNA产率一般在1-3ug。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
酸洗玻璃珠，400 um	25g
溶液A	25mL
溶液B	25mL
溶液C	75mL
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液	10mL
使用手册	1份

储存条件：常温运输及保存，保存期为一年。

使用方法：
1. 对菌液：取3-5mL过夜培养的酵母菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中，12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2. 对菌落：用接种针在在培养基上刮取尽可能多的酵母菌落，转移到装有1mL水的干净的塑料离心管中，洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3. 对孢子材料，一般取0.1g左右，直接加入到离心管中，然后进入下一步操作。
4.在材料中加入无菌水1mL，振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
5.沉淀中加入500μL溶液A和0.5克的玻璃珠，涡旋震荡10分钟。
6. 加入500μL的溶液B，涡旋震荡，12000rpm离心2分钟，将上清液全部转移到一个5mL的干净的塑料离心管中。或者每管0.3mL，分别转移到2-3个1.5mL的干净的塑料离心管中。
7.在上清中加入3倍体积的溶液C，颠倒数次混匀后，分三次上离心吸附柱，每次上柱后均先室温放置2分钟，然后12000rpm离心1分钟，倒掉穿透液，再第二次上柱，重复上面的操作，直到挂柱步骤完成。
8.在离心吸附柱中加入500μL通用洗柱液，12000rpm离心1分钟，倒掉穿透液。
9. 重复上步操作一次。
10. 12000rpm空柱离心1分钟。
11. 加入50-100μL DNA洗脱液，室温放置1分钟以上，12000rpm离心1分钟，穿透液即为酵母DNA样品。
12. 为了得到更多的DNA样品，可以重复上步操作1-2次。
13. 所得DNA即可立即使用或放冰箱长期保存。


我公司的BTN130992型柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)销*(代"售")，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
ARB12476 大鼠前列腺素E2(PGE2)elisa检测 Rat prostaglandin e2,pg-e2 ELISA KIT
PY04-044  复达欣  3mg/支×10支  每支添加于100 ml李氏菌选择性培养基基础(MMA)中，用于单增李氏菌的选择性分离
F030441 胶体金标记小鼠抗鸡IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Chicken IgY*GOLD
孔雀绿草酸盐 Cuprizon 2437-29-8
单丙*(代"酮")葡萄糖 CBZ-D-Glu 18549-40-1
ARB12168 大鼠白介素32(IL-32)Elisa方法检测 Rat interleukin 32,IL-32 ELISA KIT
SJ0257 EDTA FREE ACLD 乙二*(代"胺")四乙酸
M0113 ELISA液体广谱防腐剂                     
71-30-7 胞嘧啶 Cytosine
ARB13547 兔子S100B蛋白(S-100B)elisa检测 Rabbit soluble protein-100b,s-100b ELISA KIT
PY02-205  Campy-Cefex琼脂基础  250克  
59-23-4 D-半乳糖 D(+)Galactose
F030641 FITC标记小鼠抗鸡IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Chicken IgY*FITC
BTN131094 生物素化的牛血清白蛋白 Biotin-BSA
F040320 大鼠IgG抗原 Rats IgG
对*基*甲*(代"酸")甲酯 Luciferase firefly 619-45-4
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CYB162011 兔抗小鼠IgG(抗血清) 0.5ml
BL1343 PH值标准液(PH6.86)
BL0866 羊抗人纤维蛋白原免疫血清
*乐灵 BOC-Nim-benzyl-L-Histidine 1582-09-8
CYB163019 羊抗人白蛋白-FITC
F030213 HRP标记兔抗小鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Mouse IgG*HRP
137-16-6 Sodlum Lauroylsarcosine 十二烷基肌*酸*
PY02-402  CATA琼脂  100克  
ARB12306 大鼠抗精子抗体(AsAb)检测服务 Rat anti-sperm antibody,asab ELISA KIT
**尼考 Papain 73231-34-2
偶氮脒类引发剂V40 CIB 2094-98-6
磷酸*二*七水物 Piperine 7782-85-6
ARB11708 人黑色素细胞刺激素(MSH)代做ELISA实验 Human melanocyte stimulating hormone,msh ELISA KIT
PY02-135  菌种保存培养基  250克  
ARB13636 兔子脂联素(ADP)Elisa方法检测 Rabbit adiponectin,adp ELISA KIT
ARB11518 人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)elisa检测 Human thymic stromal lymphopoietin,tslp ELISA KIT
PY04-028  多粘菌素(I)  1.2mg/支×10支  每支添加于100ml亚硫*(代"酸")盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)培养基中，用于产气荚膜梭菌的平板计数
BTN130665 Cre重组酶 Cre Recombinase
ARB14092 人布病(BrucellosIs)含量测试 
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·5´末端同位素标记试剂盒
编号：BTN131036
英文名称：DNA 5´End-Labeling Kit
规格：20次
本产品为DNA 5´末端标记系统，利用T4 Polynucleotide Kinase(T4多聚核苷酸激酶)和［γ-32P］ATP 对粘性末端或平末端的DNA或RNA的5´末端进行GX标记反应。原理如下：


产品特点：
1. 使用本试剂盒之前，不需要对 5´末端的磷酸基团进行去磷酸化处理，因为使用的kinase 能使5´末端的磷酸与[γ-32P]ATP的γ-磷酸进行交换。
2. 合成的单链或双寡核苷酸的5´末端游离的OH基团都能通过Kinase反应被标记(或者只是简单的磷酸化)。
3. 提供的两种反应液使交换反应和磷酸化反应都能GX进行，均能得到大于106 cpm/pmol(5´-end)的比活性。

试剂盒组份：

成分	规格
T4 多聚核苷酸激酶(10U/μL)	20μl
5×交换反应缓冲液	100μl
10×磷酸缓冲液	50μl
Control DNA	20μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、交换反应
1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、100%乙醇、70%乙醇等
2.在微量离心管中制备下列反应液：

成分	加入的体积
自备的5´磷酸化DNA片段	14μL(≤5 pmoles的5´末端)
5×交换反应缓冲液	5μL
[γ-32P]ATP	5μL
T4 多聚核苷酸激酶(10U/μL)	1μL
灭菌的超纯水	补足到25μL

注：5 pmoles的5´末端约等于0.17μg的长100bp的双链DNA。
3. 37℃反应30分钟。
4. 70℃加热5～10分钟使酶失活。
5. 加入10μl的7 M CH3COONH4(pH4.5)。如使用CH3COONa做乙醇沉淀时使其终浓度达300mM。
6. 加入87.5μl(2.5倍)的冷无水乙醇，-20℃放置30～60分钟。
7.离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。
注：通过第5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要完全将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*酚抽提除去蛋白质时，请在第8 步之后进行。

二、磷酸化反应标记

A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/*仿、3 M NaCl 、100%乙醇、70%乙醇、牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)等
2.在微量离心管中制备下列反应液：

成分	加入的体积
自备的DNA片段	133μL(≤10μg)
1M Tris-HCl，pH8.0	15μL
牛小肠碱性磷酸酶(CIAP，10～20U/μL)	2μl
灭菌的超纯水	补足到150μL

3. 50℃反应30分钟。
4. 加入150μl的TE 饱和酚/*仿/异戊醇(25：24：1)，充分混匀。
5.离心，取上层(水层)移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入7.5μl的3 M NaCl(ZZ浓度150mM)。
8. 加入375μl(2.5倍量)的冷无水乙醇，-20℃放置30～60分钟。
9.离心回收沉淀，用 1mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。
10. 使用 20μl的TE Buffer 溶解沉淀。

B. 磷酸化反应(前反应)
1.在微量离心管中制备下列反应液：

成分	加入的体积
自备的DNA片段	20.5μL(≤5 pmoles的5´末端)
10×磷酸缓冲液	2.5μL
[γ-32P]ATP	1μL
T4 多聚核苷酸激酶(10U/μL)	1μL
灭菌的超纯水	补足到25μL

2. 37℃反应30分钟。
3.下面的操作与交换反应的第4-8 步操作相同。

三、合成DNA 寡核苷酸的标记
1.在微量离心管中制备下列反应液：

成分	加入的体积
Oligonucleotide DNA with free 5´-OH(5～10 pmoles)	≤3μL
10×磷酸缓冲液	2.5μL
[γ-32P]ATP	1μL
T4 多聚核苷酸激酶(10U/μL)	1μL
灭菌的超纯水	补足到25μL

2. 37℃反应30分钟。
3.下面的操作与交换反应的第4-8 步操作相同。

四、合成DNA 寡核苷酸的标记
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱(需另购)对于去除未掺入的dNTPs效果很好，它还能大幅减少小于20个碱基的DNA 寡核苷酸和小于20bp的双链DNA的量。使用之前需要在70℃加热5～10分钟以使T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于10个碱基的寡核苷酸。

注意事项：
1.缓冲液可在室温融解。融解后立即置于冰中，使用前充分混匀。
2. 5×交换反应缓冲液于-20℃冻结保存时会有白色浑浊出现，但不影响反应效果。
3.酶切得到的DNA片段需经乙醇沉淀等方法纯化。
4. 当用于交换反应的DNA在5 pmoles以上(约1,000bp以上)时，标记效率有时会低于106 cpm/pmol。
5. 如果交换反应所用 DNA低于500bp时，标记效率有时会有所降低。
6. 若不进行放射线标记，仅使用本试剂盒做5´末端磷酸化反应时，反应体系中的［γ-32P］ATP可用5μl的10mM ATP 代替。
7. 磷酸化反应时的［γ-32P］ATP可用［γ-35S］ATP 替代。

使用举例：
按照使用方法中交换反应和合成DNA 寡核苷酸的标记的实验操作，取λ-BstP I，λ-Hpa I，λ-EcoT22 I 各3 pmols，用［γ-32 P］ATP 通过正向磷酸化反应或交换反应标记。各DNA片段的放射自显影结果如下所示：

北京百莱博科技有限公司是DNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购BTN130992型柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)销*(代"售")。