RNA长期保存液说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖RNA长期保存液说明书在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：RNA长期保存液说明书
规格：2ml
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：RNA long-term preservation solution
本品可以允许RNA在4℃过夜或-20℃保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的ZJ选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。

用RNA长期保存液溶解RNA沉淀：
1. 对固体RNA 沉淀，每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA 长期保存液，反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA 沉淀难以溶解，可反复吹打混匀后50℃加热10-15 分钟。先用小体积无RNase 的TE 或水溶解RNA沉淀，然后按液态RNA 操作。
2. 对液态RNA 溶液，每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液，混匀。注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。
3. 测定OD 值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。
4. 将溶解的RNA 样品储存于-20℃或者-70 ºC。

从RNA长期保存液中沉淀RNA：
1. 估计RNA 溶液终体积。加入4 倍体积的无水乙醇，混匀。如果溶液体积过小操作不便，可加入RNase free water 稀释RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低于
0.25μg/μl，可加入5M NaCl(RNase free) 至终浓度0.2M,混匀，然后再加入4 倍体积乙醇。
2. 室温放置5 分钟。
3. 12000rpm，5 min。弃上清。风干，溶解。
4. 重新沉淀的RNA 溶解后可用于RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。

直接使用RNA长期保存液中的RNA：
直接吸取RNA长期保存液中的RNA，进行普通或甲醛变性电泳和Northern Blot。进行甲醛变性电泳时，ZH上样的样品中的RNA长期保存液的浓度可高达50%。
附：甲醛变性电泳样品准备： 临用前，混合水（87μl），甲醛（81μl）, 50%甘油/含0.25 mg/ml *芬兰(48μl) 和20X MOPS (24μl). 将上述混合液和RNA 长期保存液中的RNA 样品等体积混合，55℃温育10 分钟，按照标准的甲醛变性电泳过程上样。

注意事项：
1. RNA 长期保存液可能YZ逆转录酶活性，做RT-PCR 反应前应该用乙醇沉淀RNA。
2. 在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg/μl。

储存条件：4℃

本品别名：RNA保存液(长期保存RNA)|RNA长期保存液|防止RNA降解剂|长期RNA保存液|RNA防降剂

更多有关RNA长期保存液说明书的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
甜蜜素 Asparaginase from Escherichia coli 139-05-9
ARB12078 大鼠内皮素1(ET-1)Elisa分析 Rat endothelin 1,et-1 ELISA KIT
DL-丙*酸 Diphenylcarbinol 302-72-7
ARB11154 人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)含量检测 Human mast cell tryptase,mct ELISA KIT
二聚对二甲* Brilliant Yellow 1633-22-3
67-42-5 EGTA  乙二醇－双－(2－*基乙基)四乙酸
琼脂糖凝胶6FF X-GalNAc
BTN130859 M13mp18 DNA M13mp18 DNA
芽孢染色液   3×20ml|3×50ml
SJ0409 MUG4 甲基伞形酮葡萄糖苷酸
E0606 脱纤维裂解驴血(无菌)
ARB14034 植物维生素D(VD)定量分析 Plant vitamin d,vd ELISA KIT
ARB10307 人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)酶联免疫定量检测 Human macrophage inflammatory protein-3β,mip-3β ELISA KIT
二甲基黄  PHYTIN 60-11-7
软骨染色液(阿利新蓝法,pH2.5)   2×50ml
50-02-2 地塞米松 Dexamethasone
ARB10825 人抗肝可溶性抗原抗体(SLA)酶标法分析 Human proteinase 3 antibody,pr3ab ELISA KIT
ARB11815 人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA检测服务 Human annexin Ⅴ,anx-Ⅴ ELISA KIT
BTN61202 一步式广谱DNAOUT Magic DNAOUT
ARB13504 鸡碳酸酐酶(CA)Elisa分析 Chicken carbonic anhydrase,ca ELISA KIT
ARB11425 人载脂蛋白H(Apo-H)Elisa方法检测 Human apolipoprotein h,apo-h ELISA KIT
BTN60106 加T试剂盒 dT Tailing Kit
RNA长期保存液说明书关键词：长期RNA保存液,RNA长期保存液,RNA保存液(长期保存RNA),防止RNA降解剂


·鱼类组织DNA提取试剂盒
编号：ALH181
英文名称：Fish tissue DNA Extraction Kit
规格：50次|100次
本试剂盒采用独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， YZ物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， ZH低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。本试剂盒适用于快速提取各种鱼类、虾类、扇贝等组织基因组DNA。

试剂盒组份(100次)：
裂解液SL————————————20ml
结合液CB————————————20ml
YZ物去除液IR—————————50ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
蛋白酶K————————————2×20mg
吸附柱AC————————————100个
收集管(2ml)——————————100个

注意事项：
洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH 大于7.5， pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在－20℃。DNA 如果需要长期保存，可以用TE 缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl， 1mMEDTA，pH 8.0），但是EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
提示：DY次使用前请先在漂洗液WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
1. 切取不多于30mg 的组织材料，放入装有180μl 组织裂解液SL 的1.5ml 离心管中，涡旋振荡15 秒。
根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果裂解困难，可先用液氮研磨。
2. 加入20μl 的蛋白酶K 溶液(20mg/ml)，立刻涡旋振荡充分混匀。将裂解物放置在55℃水浴1-3 小时或者直到组织消化完全。
不同组织裂解时间不同，通常需0.5–2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
可选做步骤: 如果RNA 残留较多，需要去除RNA，可在完成步骤2 后加20μlRNase A(25mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10 分钟。
3. 加入200μl 结合液CB，立刻涡旋振荡充分混匀，70℃放置10分钟。
4. 冷却后加100μl 异丙醇，充分颠倒或涡旋振荡充分混匀，此时可能出现絮状沉淀。
5. 将上一步混合物和可能的沉淀都加入一个吸附柱AC 中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm 离心60 秒，倒掉收集管中的废液。
如果有不溶组织物可能堵住枪头，可将枪头在吸水纸上轻蹭去除不溶物；如果吸上来的混合物少则可以将枪头和不溶物一起弃去，该做法是为了去除不溶物，以免堵塞离心柱。
上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要，混匀不充分严重降低产量，必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。
6. 加入500μl YZ物去除液IR，12000rpm 离心30 秒，弃废液。
7. 加入700μl 漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12000rpm 离心30秒，弃掉废液。
8. 加入500μl 漂洗液WB，12000rpm 离心30 秒，弃掉废液。
9. 将吸附柱AC 放回空收集管中，13,000rpm 离心2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇YZ下游反应。
10. 取出吸附柱AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加100μl 洗脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中预热效果更好），室温放置3-5 分钟，12000rpm 离心1 分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2 分钟，12000rpm 离心1 分钟。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积不应少于50μl，体积过小降低DNA洗脱效率，减少DNA产量。
11. DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。


RNA长期保存液说明书关键词：长期RNA保存液,RNA长期保存液,RNA保存液(长期保存RNA),防止RNA降解剂


·20×Sybr Green I(荧光定量PCR级)
编号：ALH199
英文名称：20×Sybr Green I(qPCR Grade)
规格：20μl×100次|20μl×1000次
本品SYBR Green I与dsDNA 结合荧光信号可增强800～1000倍。在PCR反应体系中，加入过量SYBR Green I荧光染料，它特异性地掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中的SYBR Green I染料分子荧光不变，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。荧光可以在退火阶段或者延伸阶段测定。

使用方法：将20×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系，使终浓度为0.5× （0.2×到1×之间调整）。

注意事项：
1．使用浓度对荧光PCR结果的影响
SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低，这就意味着低拷贝的样品可能无法检出。而在高浓度时，将会YZPCR反应，降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为0.2×到1×之间。
2．*离子浓度的影响
提高*离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的YZ作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时，*离子浓度比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应高出0.5～3mM。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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