5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇)特价促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇)特价促销在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇)特价促销
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
规格：10ml
产品简介：
本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，β-巯基乙醇，*酚蓝，缓冲盐溶液等。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的*键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，β-巯基乙醇可以断开半胱*酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的四级结构，消除了蛋白结构之间的差异。ZZ无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。*酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
保存时间：
未混合前2-8℃可保存一年，混合后保存三个月。
使用说明：
1． 根据用量，以每1ml的5×蛋白上样缓冲液加入50ulβ-巯基乙醇，混匀。此即为配好的蛋白上样缓冲液。此配好的蛋白上样缓冲液在2-8℃保存三个月。
2． 请按每40微升蛋白样品加入10ul配好的上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释。
3． 混匀后，100℃水浴加热3-5分钟，使蛋白变性。
4． 冷却到室温后，离心数秒后，混均再离心30秒取上清直接上样即可。
注意事项：
β-巯基乙醇味道特别难受，所有操作是在通风柜中操作。如果没有通风柜，也尽量找一通风处操作，或者使用5×蛋白上样缓冲液（含DTT）。
8%胶时*酚蓝大概在30kd左右， 12%胶时，约在20kd左右，15%胶时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

我公司的5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇)特价促销，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·DNA产物纯化试剂盒
编号：XH015
规格：100T/400T
原理简介
本试剂盒利用独特的缓冲液，可从PCR产物，连接产物，酶切产物等溶液中回收较大DNA片段，同时除去其它蛋白、无机盐及寡核苷酸引物等杂质。
对于50ul的含DNA样品，本试剂盒（以100T为例）可用100次。对于更小体积的样品，本试剂盒使用次数更多。如果一次纯化1ml样品，本试剂盒（以100T为例）可用5次。
注意事项
1、回收<200bp DNA片段时，应加大结合液的体积（如8倍体积或者更高）。
2、玻璃奶的多少决定吸附能力的大小，对于核酸含量低的样品，可适当减少加入量，同时减少加入洗脱液的量（TE缓冲液）。
3、如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1．将含有DAN的样品离心，取上清转移到一新的离心管中（如无沉淀，可省去此步）。
2．向溶液中加入5倍体积结合液（如为小片段，可加入8倍体积或者更高体积）混匀。正常情况应该为淡黄色，如溶液变红，请加入不超过1/10体积的3M 乙酸* PH5.2。
3．玻璃奶混匀。取50ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中，混匀（如DNA含量过低，可减少玻璃奶加入量，如只加入20ul）。
4．室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5．10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清（70%乙醇洗两次，无水乙醇洗一次）。
6．室温放置10分钟，加入50ul左右TE缓冲液混匀溶解，50-55℃水浴5分钟。离心，取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。

·2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料）
编号：XH035
规格：1ml/10ml
产品简介：
本公司生产的PCR MasterMix中加入了高性能PCR增强剂和稳定剂，适用于常规的PCR反应。由于多种PCR增强剂和稳定剂的发现，稳定GX预配好的PCR混合液不仅简化了操作程序、减少了污染、大大降低劳动强度和取样误差，而且增加了PCR反应的特异性，降低了对PCR条件的要求，使实验结果更加精确。
该产品分为含染料和不含染料两种体系，含染料是指含有电泳指示剂（并不含核酸染料），PCR结束后可以直接电泳，但象EB之类的染料还是必须加的。
质量控制检测：
经检测无外源核酸酶活性，PCR方法检测无宿主DNA残留，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，所有产品在-20℃条件下可保存一年以上，4℃放置三个月或室温放置一周，依旧有很好的活性。


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·SABC(小鼠IgG)-FITC免疫组化试剂盒
编号：XH109
规格：100T
试剂盒组成:
1， 封闭液：10ml，5%BSA
2， 生物素化羊抗小鼠：浓缩液100ul。
3， SABC-FITC:浓缩液100ul。
4， 稀释液：30ml。
5， 抗荧光衰减封片剂

试剂盒简介：
本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验. FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂：
1．粘片剂多聚赖*酸
2． 0.01 M PBS（pH7.2-7.4)
3． 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2．热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS（pH7.2-7.6）洗涤1-2次。
3．滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4．用稀释液将一抗（如小鼠抗IL-10）按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
5．根据使用量,用稀释液将生物素化羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗小鼠IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗小鼠IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。
6．根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃，30分钟(避光)。PBS（pH7.2-7.4）洗5分钟×4次。
7．滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后封片观察。


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·辣根过氧化物酶（HRP）标记套装
编号：XH087
规格：一套
保存条件：HRP（辣根过氧化物酶）-20度保存，透析袋2－8度处理。其他常温保存。
产品说明：本套装是将HRP标记的常用试剂集合为一体而成。本操作流程为经碘的高碘酸氧化法。适合于蛋白等含有*基物质的标记。特别是抗体的标记。
如果待标记物分子量太小（如小于15KD），可能会穿过透析袋而造成样品损失。
标记原理：在低PH下使RP经NaIO４氧化后形成的醛基可蛋白等分子的*基相连，形成斯夫氏硷，后者可进一步用NaBH４还原生成稳定的酶标记物。
操作方法：
一， 标记量的计算：HRP（辣根过氧化物酶）分子量为40KD左右。一般为HRP：待标记物＝2：1到4：1之间。比如抗体IgG分子量一般为150－160KD。则10mg HRP可标记抗体在10mg-20mg之间。
二， 计算好各步反应时间。作好开始标记的准备工作，是从下午开始。将HRP（辣根过氧化物酶）一共10mg加入1ml双蒸水溶解。溶解后可放－20度存放一个月。如果想作两次标记，可适当称量5mg。但并不推荐称量更小的质量。以免产生更大误差。而且透析袋一般也只够两次用量。
三， 剪切合适长度透析袋，用双蒸水清洗三次备用。透析袋分宽窄两种，适合于不同量样品的透析，请自己安排。称取21.3mg NaIO４，加入0.5ml双蒸水溶解(现配现用，浓度为0.2M)，将100mM乙酸*（PH4.4）用双蒸水稀释100倍成1mM乙酸*（PH4.4）。准备待标记物，如果待标记物本身盐含量很低并且缓冲力差，如生理盐水，可等二天再准备。如果不确定，将0.2M PH9.5 CB稀释20倍（请不要一次稀释完，留1－2ml左右备用），作为透析液，将待标记物装入透析袋中4℃透析过夜，透析袋适当留长约2ml体积的量以备第二天加入酶（透析袋使用请见附录）。
四， 以一次标记完为例，如果标记量小，可按比例减小试剂的用量。取0.2ml现配的NaIO４溶液加入HRP溶液中，混匀，避光常温反应两小时。装入透析袋中，在稀释过的乙酸*（PH4.4）溶液中4℃透析过夜（透析袋使用请见附录）。
五， 第二天早上，如果样品为固体，可用水溶解，加入1/20体积的0.2M PH9.5 CB，混匀。取出活化好的HRP装入一适合离心管中，加入50ul 0.2M PH9.5 CB，混匀，立刻加入待标记物中，混匀。避光常温反应两小时。
六， 加0.1ml新配的10mg／ml NaBH４液，混匀，常温半小时。
七， 配制合适的透析液，如生理盐水或者PBS等。透析酶标记物。
八， 如果有条件进一步纯化，可透析半天后去进一步纯化，如果不纯化，请在4℃透析至少24小时。勤换液。

附透析袋使用方法：
本透析袋已预处理过，用双蒸水清洗后将水用适当吸一下。就可直接使用。透析袋上下都可以用铁夹，但如果铁夹不够用，下部可用细线或者其他的透析袋夹。
将透析袋轻轻的折上两到三折。用线或者透析袋夹封住，上面支开，加入待透析物，留一定量的空气在顶上，并小心的折一折，用铁夹夹住，轻轻的挤压，如没发现有液体流出，可放入透析液中。一般透析可用纯净水瓶去顶使用。用一次性筷子或者其他合适物穿过铁夹，将透析袋吊在透析液中，补充透析液，使透析液盖过透析袋中的液面而不要淹过铁夹下面。

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