5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇)厂家现货

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北京百奥莱博专业生产销售5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇)厂家现货，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

产地：国产|进口
规格：10ml
编号：XH056
品Pai：百奥莱博
产品简介：
本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，β-巯基乙醇，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的四级结构，消除了蛋白结构之间的差异。ZZ无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
保存时间：
未混合前2-8℃可保存一年，混合后保存三个月。
使用说明：
1． 根据用量，以每1ml的5×蛋白上样缓冲液加入50ulβ-巯基乙醇，混匀。此即为配好的蛋白上样缓冲液。此配好的蛋白上样缓冲液在2-8℃保存三个月。
2． 请按每40微升蛋白样品加入10ul配好的上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释。
3． 混匀后，100℃水浴加热3-5分钟，使蛋白变性。
4． 冷却到室温后，离心数秒后，混均再离心30秒取上清直接上样即可。
注意事项：
β-巯基乙醇味道特别难受，所有操作是在通风柜中操作。如果没有通风柜，也尽量找一通风处操作，或者使用5×蛋白上样缓冲液（含DTT）。
8%胶时溴酚蓝大概在30kd左右， 12%胶时，约在20kd左右，15%胶时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

更多有关5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇)厂家现货的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：
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·去内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号：XH012
规格：50T/200T
原理简介
本试剂盒在常规质粒提取试剂盒的基础上改进而来，增加内毒素清步骤，提取的质粒可用于一些要求更高的实验，如转染。
本试剂盒（以200T为例）可以用200小次或者10大次提取。
注意事项
1．溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀，可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2．溶液Ⅰ中加入RNase 后请放2-8度保存，如果长久不用（如一个月），可-20度冻存，或者按照比较分次加入。
3．可根据实验情况中量或者大量提取，加入的试剂等比放大。
4．内毒素清除剂在常温下出现面混浊现象，为正常，在2-8℃放置一段时间混浊会消失。
5．本试剂盒在去除内毒素的过程中会损失少量质粒，因而相对于常规提取，本试剂盒得率偏低。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA，混匀，2－8度保存。
1．取过夜菌1-5毫升，5000g离心1分钟收集细菌沉淀，弃上清（可重复多次收集于一管中，收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数），如为阳性细菌，可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液，37度处理30分钟，离心，收集沉淀。
2．在收集的菌液中，加入200ul溶液I，重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开，无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3．每管加入200ul溶液Ⅱ（如有沉淀，可37度水浴），轻轻颠倒离心管4-6次，使细菌完全裂解，溶液透明。放置2-3分钟，不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4．放置2-3分钟后，每管加入200ul溶液III，随即颠倒离心管4-6次混匀，可见白色絮状物产生。
5．ZG速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6．将上清转移到新的离心管中，如有沉淀，可再次离心。
7．加入上清1/5体积冰预冷的内毒素清除剂，振荡混匀，溶液变浑浊，冰浴2min至溶液变清亮。
8．37℃水浴2min，不时振荡，溶液又变浑浊。12000rpm室温离心2min，溶液应分为两相，上层水相含质粒DNA，下层油状相含内毒素。
9．将含质粒DNA的上层水相转移至新管，弃下层油状相，注意不要吸入油状相。重复抽提三次，即重复步骤7-9三次。
10．在得到的上清中加入等体积的结合液，再加入等体积的无水乙醇，混匀（上清：结合液：无水乙醇＝1：1：1）
11．玻璃奶摇匀。取20ul混匀的玻璃奶加入上面的混合液中，混匀。室温放置5分钟，期间颠倒2次。
12．10000转/分钟离心1分钟，倒掉上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
13．室温放置10分钟（如果为大提，请延长放置时间到30分钟，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入30－50ulTE缓冲液混匀溶解，55℃水浴5分钟。离心，取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
14．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。


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