转录组测序介绍真核生物转录组测序,利用高通量测序可全面快速地获得某一物种特定细胞或组织在某一状态下转录的所有mRNA进行测序,用于研究基因结构和基因功能、可变剪接和新转录本预测等。转录组研究已经成为揭示生物生长发育调控、逆境胁迫和抗病反应机制的ZJ研究手段。
真核生物转录组测序项目流程 数据分析内容 mRNA分析 | | |
测序序列质量评估 | 饱合度分析 | 基因差异表达分析 |
数据预处理 | 基因表达定量分析 | 差异基因GO富集分析 |
基因组比对 | 表达相关性分析 | 差异基因KEGG富集分析 |
翼和特色 |
有参转录组测序项目信息分析 |
严格数据质控保证数据分析可靠性 |
6Gb/每个样本 |
多种有参考基因组的物种进行了转录组测序分析经验 |
样品要求 - 样品类型:细胞、新鲜组织或RNA样品。
- 样品的量:细胞样品请提供至少1×10^7个细胞,组织样品请提供至少300mg的组织块或切片,RNA样品请提供4 μg以上的总RNA。
- 样品质量:RNA无明显降解,提取的total RNA OD260/280值在1.8~2.0之间,浓度 ≥ 50 ng/μl,RIN≥7。
- 样品保存:细胞样品或新鲜组织块(切成~50mg的小块)可用TRIZOL或RNA保护剂处理或液氮冻存后,-80℃保存。RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中,-80℃保存。样品保存期间避免反复冻融。
- 样品运输:样品置于1.5 ml管中,封口膜封好,干冰运输。