测序类服务：小RNA 测序技术服务

实验技术简介：小 RNA序列高度保守，可以调控基因的表，长度在18-30nt，主要包括miRNA、snRNA、snoRNA等。小RNA测序技术采用胶分离技术，收集 样品中15-35nt的RNA片段，利用高通量测序技术，一次性获得单碱基分辨率的数百万条小RNA序列信息，依托强大的生物信息分析平台，鉴定已知小 RNA，从而解析miRNA、snRNA、snoRNA和其它非编码RNA以及相应靶序列。

 

实验操作流程：
1、Total RNA抽取质粒
2、回收目的片段纯化
3、连接5' 和3' RNA接头
4、反转cDNA
5、PCR扩增
6、上机测序
7、生物信息分析

 

实验注意事项：
客户提供：
1、RNA：去蛋白并进行DNase 处理后的完整总RNA
2、组织：液氮处理，植物 ≥20ug ；动物 ≥10ug ；也可液氮研磨成粉末后加入Trizol （50-100mg 加入1ml Trizol ）；
3、全血样品：需新鲜样品时加入3 倍体积Trizol  LS ，以防止RNA 降解。
4、浓度≥200ng/ul，纯度OD 260/280 =1.8~2.2 ；RIN ≥8
交付标准：
1、可结合客户的材料与需求，协商确定定制化信息分析内容。
2、数据产出统计：对测序结果进行图像识别（Basecalling），去除污染及接头序列；
   统计结果包括：测定的序列（Reads）长度、Reads数量、数据产量。
其他：
1、全物种覆盖：可对任意物种的miRNA进行检测
2、同时检测已知的和新miRNA ：不仅可以检测miRBase中已知的miRNA，还可以发现新的miRNA
3、实时更新的miRNA数据库信息：可随时利用ZX的miRBase数据库对数据进行再分析，数据有效
4、灵敏度高：可检测在单个细胞中仅一个拷贝的低丰度miRNA
5、精确度高：可准确区分单碱基差异的miRNA

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