HR8065 酵母膜蛋白/细胞质蛋白提取试剂盒

特别提示：包括酵母膜蛋白/细胞质蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：酵母膜蛋白/细胞质蛋白提取试剂盒

英文名称：Yeast membrane protein / cytoplasmic protein extraction kit

产品货号：HR8065

产品规格：50T|100T



跨膜蛋白承担各种生物功能，膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。

酵母膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。酵母膜蛋白提取试剂盒可以从各种酵母样本中提取膜蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶YZ剂混合物和磷酸酶YZ剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，可用于各种下游实验。



储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶YZ剂-20℃保存。

有效期：一年。



注意事项：

●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或ZL。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品Pai的试剂混用，否则会影响使用效果。

● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。



产品特点：

1．使用方便。

2．将蛋白提取的时间缩短至1小时。

3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5．蛋白酶YZ剂YZ了蛋白的降解，蛋白酶YZ剂配方优化。蛋白酶YZ剂混合物包含6种独立的蛋白酶YZ剂；每一种YZ剂可特异性YZ某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以YZ几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。



试剂盒以外自备试剂和仪器：

● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒



使用方法：



使用注意事项：

● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

●蛋白酶YZ剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶YZ剂单品。



使用方法：

1．每500μl蛋白提取液A中加入2μl蛋白酶YZ剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2．取50ml酵母培养物，在4℃，2500g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。

3．用冷PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4．每100μl体积酵母沉淀物中加入500μl酵母蛋白提取液A，混匀后，在室温或37℃条件下振荡30-60分钟。

5．在2-8℃条件下振荡20-30分钟。

6．将提取液在4℃条件下12000g离心5分钟，取上清。

注：此时酵母已溶解于提取液A，应无大量酵母菌体沉淀，若有大量未溶解酵母菌体，请延长步骤4和步骤5的振荡时间，振荡中途可用移液器吹打混匀。

7．在上清中加入5μl提取液B，充分混匀。

8．在37℃水浴10分钟。

9．在37℃ 1000g离心3分钟。

10．此时溶液分为2层，小心吸取上层部分，即为酵母细胞质蛋白。

11．管底部下层部分大约50μl液体即为酵母膜蛋白。用50-100μl膜蛋白溶解液溶解该溶液，即得酵母膜蛋白样品。膜蛋白和胞质蛋白样品可以用Bradford或BCA方法进行定量，调整相应的浓度用于下游实验。



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名称：水蛭素溶液(2万ATU/mL)

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规格：0.1mL

本产品为水蛭素水溶液，浓度为20000ATU/mL，工作浓度为150-200ATU/mL。水蛭素是从水蛭及其唾液腺中提取的含65个氨基酸残基的小分子蛋白，水蛭素对凝血酶有极强的YZ作用，是迄今为止所发现zuì强的凝血酶天然特异YZ剂。基因重组水蛭素是一种单链环肽化合物，相对分子量约为7000 道尔顿，是目前发现的zuì强的凝血酶YZ剂，其作用不依赖于抗凝血酶Ⅲ。



产品特点：

1.其优点是抗原性弱，少有过敏反应。

2. 不与血小板结合，极少导致血小板减少。

3. 稳定性好，毒性低。



储存条件：低温运输，-20℃保存。



活力单位定义：一个YZ单位ATU(anti-thrombin unit)指，37℃下，灭活一个NIH 单位凝血酶的量



使用方法：根据具体实验要求不同，加入所需要量的本产品。一般建议工作浓度为150-200ATU/mL。用户可以按照要求稀释本产品。后续按照常规操作即可。



名称：非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X)

货号：YT054

规格：2ml

本品是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液，本产品中不含SDS等变性试剂，也不含DTT、巯基乙醇等还原性试剂，可以用于常规的非变性非还原性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)蛋白样品的上样。



储存条件：-20℃，有效期一年。



名称：彩色预染蛋白分子量标准(10-170kD)

货号：YT621

规格：200μl|600μl|3ml

本品包含了从10kD到170kD共10种纯化的预染蛋白质，其中15kD和70kD条带为红色，其余条带为蓝色(参见下图)，适合作为SDS-PAGE或Western的蛋白质分子量标准。特别适合在Western时使用，这样在转膜后可以直接并清楚地观察到转膜效果。须注意右图所示分子量仅适用于常规的Tris-Glycine凝胶。根据上样孔的大小，本彩色预染蛋白质分子量标准通常每次上样3-5微升，即可在电泳时、电泳后或转膜后观察到非常清楚的蛋白条带，一个包装的本产品大约可以使用约40-65次。



产品特点：

1. 提供了两条鲜艳的红色条带(15kD和70kD)，有利于快速准确辨认蛋白质分子量标准的条带。同时本产品中含有类似于溴酚蓝的指示性红色染料，电泳时会呈现红色条带并处于zuì前沿。

2. 提供了从10kD到170kD共10条条带，条带清晰，分子量范围比较宽，蛋白分子量比对比较方便。

3. 本彩色预染蛋白质分子量标准已经配制在1×SDS-PAGE上样缓冲液中，可以直接使用，无需煮沸。