MT0005 一步法microRNA反转录试剂

特别提示：包括一步法microRNA反转录试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：一步法microRNA反转录试剂盒

英文名称：One Step microRNA cDNA Synthesis Kit

产品货号：MT0005

产品规格：25T|100T



由于miRNA(microRNA)分子序列较小，仅20nt左右，没有真核生物特有的Poly(A)尾巴结构，采用传统Oligo dT引物和随机引物很难获得从miRNA到cDNA的反转录产物。目前普遍采用的解决方案有两种：特异性反转录引物（下图A所示）、两步加A法反转录方案（下图B所示）。Biorab公司开发出一套全新的一步法miRNA反转录试剂盒，可以对成熟的miRNA同时完成Poly(A)反应和反转录反应，直接获得含有特异性tag和15(T)的cDNA产物（下图C所示）。该方法使得miRNA反转录与mRNA的反转录一样轻松,直接将提取的microRNA与反应缓冲液混合物混合并置于PCR仪上1小时即可获得高浓度的、包含所有miRNA分子的cDNA产物,获得的cDNA产物适合于采用SYBR Green染料法进行RealTime PCR进行定量检测。







产品组成：

组分	MT000(25T)	MT0005B(100T)
4×One step miRNA RT Solution	125μl	500μl
10×miRNA RT Primer	50μl	200μl
RNase Free H2O	1ml	1ml×2

储存：请置于-20℃，可保存2年，避免反复冻融。

注：如4×One step miRNA RT Solution出现沉淀属正常现象，可用手捂化，混合均匀后使用不影响实验结果。



特别说明： 10×miRNA RT Primer 引物为5"-CAGGTCCAGTTTTTTTTTTTTTTTVN-3"，定量扩增用特异性上下游引物进行扩增，下图2是以 hsa-miR-21 为实例说明特异性上下游引物的设计方法（Biorab的microRNA 荧光定量 PCR 试剂盒提供所有 miRNA 检测，货号：MTAXXXXX，所有引物均经过设计优化，详细请于引物列表中查询。如果您研究的miRNA分子不在列表中，请来信咨询，我们将及时给您优化设计）。



图1：技术原理图：