His-taq纯化已经出现30多年了,当前毫无疑问是实验室规模纯化重组蛋白的,其它种类的亲和纯化通常只是His-Tag亲和纯化的补充。His-tag纯化的介质有琼脂糖(Agarose)\聚苯乙烯等多种基质,但是上面的配基通常就是IDA和NTA。在使用的方法上基本没有差别。但是NTA作为新一代的镍柱,它对Ni2+形成三个配位键,使得金属离子更不容易脱落,能够忍耐一定程度的双巯基还原剂(例如DTT),对杂蛋白的吸附要少一些。IDA作为老一带的镍柱也有自己的优点,那就是对His-tag的吸附能力更强,每一个Ni2+和组氨酸形成两个配位键,而不是NTA的一个。因此可以拥有更高的载量(40 mg/ml)。
实际上,两种材料的镍柱都可以胜任His-tag的纯化,除了对还原剂的忍耐力有差别外,其它的差异基本上是概念性的,非常不明显。
悦克生物科技有限公司提供NTA-Agarose, IDA-Agarose两种镍柱,产品已经出口美国市场。纯化效果,见图片。
资料下载:
产品使用手册
附件下载 (下载 68 次)
请 [登录] 后再下载!