超纯血液总RNA提取试剂盒(TRIzol法) RNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
 

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售，产品线涵盖超纯血液总RNA提取试剂盒(TRIzol法) RNA纯化在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：超纯血液总RNA提取试剂盒(TRIzol法) RNA纯化
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：ALH005
规格：20次|50次
本试剂盒本试剂盒适用于快速提取全血高纯度总RNA。采用改进的异硫氰酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA 酶， 然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， 低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品组分：

组份	20次	50次
10X红细胞裂解液RLB	10ml	25ml
裂解液RL	25ml	50ml
去蛋白液RE	15ml	25ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
70%乙醇	4ml RNase-free H2O	9ml RNase-free H2O
吸附柱	20个	50个
收集管（2ml）	20个	50个

产品特点：
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3. 独特的RL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。
4. 多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。
5. 有效的去除了5S在总RNA中含量，提高了纯度。

注意事项：
1. 次使用前请先在漂洗液瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有离心步骤如未加说明，均在室温进行。使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂氯*(代"仿")，用户使用前需要自备氯*(代"仿")。
5. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb
（18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
6. 检测OD260/OD280吸光度比值时，RNA样品应该溶于TE后检测，如果用水稀释后检测，由于一般水离子强度和PH值低，会使OD280升高，从而使比值降低。
7. 加入裂解液RL匀浆后，加氯*(代"仿")前，样品可在–60℃-70℃ 保存一个月以上。
8. 关于DNA的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留, 在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。
4) 在步骤去蛋白液RE 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 消化处理。

储存条件：室温，有效期12个月。(裂解液RL需4℃避光保存)

本品别名：超纯血液总RNA提取试剂盒(TRIzol法)|全血RNA提取试剂盒|血液RNA提取试剂盒|全血总RNA提取试剂盒

除超纯血液总RNA提取试剂盒(TRIzol法) RNA纯化外，我公司正在打折促销以下产品：

·琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
编号：ALH096
英文名称：Agarose gel DNA Recovery Kit
规格：50次|100次|200次
本试剂盒适用于琼脂糖凝胶DNA的纯化回收。在高离序盐存在的情况下，DNA*(代"片")断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(100次)：
平衡液——————————10ml
溶胶液DD—————————50ml×2
漂洗液WB—————————25ml
洗脱缓冲液EB———————15ml
吸附柱和收集管(2ml)-———100套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化*(代"钠")和高氯酸盐，不YZ回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.溶胶液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到结合效果，大大提高回收效率。
4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在结合范围内。
5.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶胶液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 回收纯化的DNA*(代"片")段一般在100bp到40kb之间，过长、过短片段的回收效率迅速降低。
4. 回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA*(代"片")断大小有关。一般1-15μg，100bp-5kb的DNA*(代"片")段，回收率可高达85％。
5. 切胶回收时，紫外灯观察对DNA*(代"片")段有损坏作用，应该尽可能使用能量低的长波紫外线，并且尽可能的缩短紫外线下处理的时间。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱，DNA*(代"片")段应该保存在－20℃。DNA*(代"片")段如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。


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·两步法耐热RT-qPCR试剂盒
编号：ALH193
英文名称：Two steps heat-resistant RT-qPCR Kit
规格：50μl×25次|50μl×50次
本系统由两个试剂盒组合而成。一个是反转录链耐热合成试剂盒（ALH268）,一个是2×SYBR Green qPCR Mix（ALH185）。首先由反转录链试剂盒合成cDNA，然后以cDNA做模板用2×SYBR Green qPCR Mix进行荧光定量PCR扩增。

储存条件：-20℃。

·酵母质粒小量提取试剂盒
编号：ALH082
英文名称：Yeast high purity plasmid small amount rapid extraction kit
规格：50次
本试剂盒适用于酵母小规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合lyticase特异消化酵母细胞壁，能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除， 低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(50次)：
RNaseA(10mg/ml)—————————150μl
Lyticase————————————2500U
溶液YP1—————————————15ml
溶液YP2—————————————15ml
溶液YP3—————————————20ml
去蛋白液PD———————————25ml
漂洗液WB————————————15ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶液YP3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 通常酵母质粒拷贝数都很低，高拷贝质粒得率一般为每5 ml 培养物提取1μg左右的质粒。用于下游试验时通常建议使用量为：1-5μl用做PCR 模板;5-10μl 用于转化大肠杆菌,选择GX率的感受态细胞。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成， 与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇， 0.1M Na2EDTA，14 mMβ-巯基乙醇)。配制方法：在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇，加入200 ml 0.5 M Na2EDTA (pH 8.0) ，不需要调节PH 值，定容到1L，4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
6. 菌体浓度检测一般OD600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml，由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD值变化也很大，以上仅供参考。
7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。



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·PCR增强剂
编号：ALH282
英文名称：PCR enhancer
规格：1ml
本品能与所有的耐热DNA聚合酶共同作用促进许多DNA模板的有效扩增，增加PCR反应的灵敏度和特异性。在PCR反应中，PCR增强剂主要通过提高DNA聚合酶的热稳定性，降低DNA的二级结构起作用。因此在遇到一些复杂模板时（如GC含量高），可通过提高退火温度，极大地减少DNA二级结构对PCR的影响，同时对酶的活性没有改变。

使用方法：本品在PCR 反应体系的终浓度一般为2％-8％，常用浓度为4％-6％，用户可以根据实际效果调整终浓度。
举例说明：50μl PCR 反应终体积中，加入2μl PCR增强剂，此时PCR增强剂的终浓度是4％。

储存条件：室温。


·一步法耐热RT-PCR试剂盒
编号：ALH272
英文名称：One step reverse transcription heat-resistant PCR Kit
规格：50μl×50次|50μl×100次
本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的，使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasinYZ剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录，大大提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率，产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。

试剂盒组分(50次)：
2×RT-PCR Mix——————————625μl
Enzyme Mix-———————————25μl
耐热RTase————————————25μl
RNase free H2O-—————————1.5ml

适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；适用于高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。

注意事项：
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
3. 不同的片段，所需RNA模板用量不同，过多的RNA会YZ反应，建议根据反应调整模板用量。
4. 不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。

储存条件：-20℃，有效期半年。

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