西班牙Biokit克锥虫ELISA检测试剂盒

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广州健仑生物科技有限公司

 保存条件：避光 2-8度 保存。

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1。接种5毫升LB/氨苄西林（五十μg/ml）培养基，放置喺10-20ml培养理中，用E.coli携带所使质粒，喺37°C.下搅拌，生长12-16钟。强烈建议将E.coli嘅Endo-阴性菌株用于常规质粒分离架嘛。噉嘅菌株嘅例子包DH5Y®同JM109®。
2。球团1.5-5毫升细菌，喺室温下离心10000×一分钟。
三。滗出或者抽吸培养基并擗。对细菌颗粒加250 UL溶液I/ RNase A，并通过涡旋或者吸液重新沉淀细胞。细胞颗粒完全再悬浮系获得良好产量嘅关键。
4。添加250 UL溶液II同10μL嘅OB蛋白酶，透过倒置同旋转理4-6次细仔捞以获得澄清嘅裂解物。喺室温下哺育十分钟系必需嘅。逃过剧烈捞，因为呢会剪切染色体DNA同降低质粒纯度。（储存溶液II喺唔使用时畀冚封盖）。
5。加350嘅UL溶液III，细仔搅拌几次，直至形成絮状白色沉淀。喺室温下离心10000×10克。
6。仔细抽吸并添加干净嘅上清液到干净嘅HIBINμDNA微柱I组装喺一个2毫升有冇收集理（讲吓嘢喇！）。确保颗粒唔受烦，冇细胞碎片畀带入柱中。离心机喺室温下10000℃离心一分钟，完全通过柱状裂解液。
7。喺塔中加五UL Buffer HB，弃液洗涤柱。离心机喺10000×一分钟离心，呢一步骤确保残留嘅蛋白质污染畀抹得甩，兼夹一定要畀包喺要高质量DNA嘅下游应用中。
8。用乙醇稀释嘅700μL DNA洗涤缓冲液擗液体同洗涤柱。离心机喺10000×一分钟离心，并擗流动。
注意：DNA洗涤缓冲液浓缩物一定要喺使用前用无水乙醇稀释。见标签嘅方向。如果雪，DNA洗涤缓冲液一定要喺使用前带到室温。