预染超低分子量蛋白质Marker
北京索莱宝原装现货供应
货号：PR1900
规格：20T (200 µ1)
保存 ：-20℃保存，有效期为一年。避免反复冻融，建议分装冻存。
产品简介:
预染超低分子量蛋白质Marker为蛋白质和多肽混合物的冻干粉，每种预染蛋白含量约为40µg，配有一支1×上样缓冲液。
使用说明:
1.开封后，溶于200 µ1 1×上样缓冲液，可根据需要进行小量分装，每管10µl，-20℃贮存，每次取一管使用，避免反复冻融。
2.使用前取分装后的小管室温融化后即可上样电泳。
凝胶制备及染色注意事项:
1.先配制分离胶，聚合后再配制夹层胶，后配制浓缩胶，3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时，30v跑1-2小时后，待指示前沿到达分离胶上沿时，把电压调至100v，至电泳结束，整个电泳过程大约需要6-8小时。
2.电泳之后可将胶置于固定液中固定 20 分钟，再进行染色，能得到较好的蛋白条带；如时间不允许，也可不进行固定直接染色。如果使用配方 7 进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:P1300)，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。
3.由于多肽所含的氨基酸数目较少，因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性)，则会影响其在
SDS-PAGE 图上的条带迁移率，即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
4.由于 SDS-PAGE 的图谱上，蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为 15,000-200,000，因此对于分子量小于 10000 的蛋白质或多肽的分子量，只能根据标准分子量进行估计，推断其是否落入预测的分子量范围。
5.由于超低分子量多肽（3000及3000以下），极易从凝胶上浸出，因此染色及脱色时间不宜太长，脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久，否则条带会消失。
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P1300-500 考马斯亮蓝快速染色
附: 小分子蛋白质SDS-PAGE 电泳试剂配制
1. 49.5% T 3 % C (配制夹层股和浓缩胶)
丙烯酰胺 48g
甲叉双丙烯酰胺 1.5g
用ddH 2 0溶解后定容至100ml
2. 49. 5 % T 6 % C (配制分离胶)
丙烯酰胺46. 5g
甲叉双丙烯酰胺3. 0g
用ddH20溶解后定容至100ml
3.凝胶缓冲液
Tris碱 182g
ddH20 300ml
用HCl调节pH值至8.45
用ddH20定容至 500ml
再加入SDS1.5g
4.10×阳极缓冲液(下槽缓冲液〕
Tris碱121. 1 g
ddH20 400ml
用HCl调pH值至8.9
用ddH 2 0定容至 500ml
5.阴极缓冲液(上槽缓冲液)
Tris碱 12 .11g
Tricine 17.92g
SDS 1g
用ddH20定容至1000ml
此溶液不用调节pH值
6.固定液
0.5% 戊二醛
30% 乙醇
用ddH 2 0定容至100ml
7. 染色液
50% 甲醇
10% 乙酸
0.2% 考马斯亮蓝G-250
用ddH20定容至500ml
