AMO-1人浆细胞瘤细胞系 专业技术指导 专注复苏

AMO-1人浆细胞瘤细胞系 专业技术指导 专注复苏
NCI-H1105细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：每周换液2-3次
ST细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：3传代,2-3天传一代
Farage细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：1：3传代,2-3天传一代
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞（绝大部分1min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化。2，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-3细胞），吹打不超过20次后（一般10次即可），成小规模聚集（10个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），比如HCT15, LS411和KM12，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100mm dish，一次Z多加入500ul，就足够了，一般我加300ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙状移动。
IGROV-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MUTZ-3细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代
细胞生长特性：半贴壁
A-431细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
胰蛋白月示琼脂，英文名：Tryptose Agar，用途：用于各种苛养微生物尤其是布氏杆菌的培养
连四盐肉汤培养基基础，英文名：Fluid Tetrathionate Medium Base，用途：用于沙门氏菌选择性分离,每100ml添加碘溶液、0.1%煌绿溶液各1支
改良GAM肉汤基础，英文名：Glfu Anaerobic Medium Broth Base,Modified，用途：用于厌氧菌的培养,每100ml添加化血红素溶液、维生素K1溶液各1支
解脲支原体琼脂基础，英文名：Ureaplasma urealyticum Agar Base，用途：用于解脲支原体培养,需添加尿素、小牛血清及YJ剂
细胞形态特性：详见细胞说明书
Iso-Sensitest 肉汤，英文名：Iso-Sensitest Broth，用途：用于抗生素药敏试验
胰酪蛋白胨葡萄糖酵母浸粉牛肉浸粉培养基(TPGYB)，英文名：Trypticase peptone Glucose Yeast Extract Beef，用途：用于肉毒梭菌增菌培养
WILL-2细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HK-2C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HEC1-A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人细胞色素C1(CYC1)ELISA试剂盒，英文名：Human CYC1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人70kDa热休克蛋白结合蛋白1(HSPBP1)ELISA试剂盒，英文名：Human HSPBP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE)，英文名：Trypticase Soy-Yeast Extract Agar，用途：用于单核增生李斯特氏菌的纯化培养
细胞背景资料：浆细胞瘤；女性
Z近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，1XPBS漂洗两次，加入1mlEDTA-Tripsin（100mm皿为例），37度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代Z重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理5-6min，C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落，2min足矣，P19Cl6和293细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
根瘤菌培养基Ⅱ基础，英文名：Nodule Bacteria Medium Ⅱ Base，用途：用于根瘤菌的保藏和培养
动力-盐培养基(B法)基础，英文名：Power-nitrate Medium，用途：用于细菌动力和盐还原试验,每100ml添加1ml甘油
GAM肉汤，英文名：Glfu Anaerobic Medium Broth，用途：用于厌氧菌的培养
脱脂奶蔗糖蛋白胨培养基基础，英文名：Skimmed Milk Sucrose Peptone Medium Base，用途：用于致病性嗜水气单胞菌的鉴别,每100ml添加1支20%脱脂奶粉溶液
4-1ST细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SF-539细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
3T3-L1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：2传代
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MC-9细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GEO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 578Bst细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人核糖核酸酶A13(RNASE13)ELISA试剂盒，英文名：Human RNASE13 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)ELISA试剂盒，英文名：HMG-CoAR ELISA Kit，规格：48T/96T
人补体成分4b(C4b)ELISA试剂盒，英文名：Human C4b ELISA Kit，规格：48T/96T
BCG牛乳培养基，英文名：Bromcresol Green Skim Milk Medium，用途：用于乳酸菌培养
改良R2A琼脂，英文名：R2A Agar, Modified，用途：用于固氮弧菌的培养
Endo培养基，英文名：Endo Medium，用途：用于大肠菌群的检测
SCC-25细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NCI-H1703[H1703]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H838细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3-1：6传代；2-3天换液1次。
人胱抑素A(CSTA)ELISA试剂盒，英文名：Human CSTA ELISA Kit，规格：48T/96T
人70kDa热休克蛋白9(HSPA9)ELISA试剂盒，英文名：Human HSPA9 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠甲胎蛋白(αFP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse αFP ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠核因子κB受体活化剂配体(RANKL)ELISA试剂盒，英文名：Mouse RANKL ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
大鼠乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒，英文名：ACH ELISA Kit，规格：48T/96T
Todd-Hewitt肉汤，英文名：Todd-Hewitt Broth，用途：用于β-溶血素制备
布氏琼脂，英文名：Brucella Agar，用途：用于布鲁氏菌属的培养
赖酸培养基(LYS)，英文名：Lysine Medium，用途：用于啤酒野生酵母检验,需添加乳酸钾并使用乳酸校正酸碱度
VRE琼脂基础，英文名：VRE Agar Base，用途：每升培养基添加1mg美罗培南和6mg万古霉素制成VRE′S
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂)，英文名：Pfizer Enterococcus Selective Agar，用途：用于粪链球菌选择性分离
CAL-148细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1792[H1792]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
NPA细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SACC-83细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
DPD培养基，英文名：DPD Medium，用途：用于原生质体的培养
TK10细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3-1：6传代；2-3天换液1次。
NCI-H1573细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代，每周2-3次。
SNU475细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；3)超净台的风机不能过大，风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染；4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
SNT8细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。