特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括小鼠IL5重组蛋白库存在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:小鼠IL5重组蛋白库存
品Pai:百奥莱博
编号:ZN1773
产地:国产|进口
来源:大肠杆菌
特异性:小鼠
应用:WB 阳性对照
形态:冻干粉
纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。
更多有关小鼠IL5重组蛋白库存的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·人CD86重组蛋白
编号:ZN1598
规格:100ng
来源:大肠杆菌
特异性:人
应用:WB 阳性对照
形态:冻干粉
纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。
·小鼠Fetuin A重组蛋白
编号:ZN1759
规格:100ng
来源:大肠杆菌
特异性:小鼠
应用:WB 阳性对照
形态:冻干粉
纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。
·X光片背景去除液试剂盒
编号:ZN1921
规格:1盒
产品保存:室温保存,一年有效
产品规格:
背景去除液 A 液 100ml
背景去除液 B 液 100ml
产品说明:适用于免疫印迹压片法检测的试验,例如常规的Western、Northern、Southern、EMSA胶片等.
使用方法:
1、X光片背景去除液工作液的配制:使用时,将等体积溶液 A和溶液 B 混合,用水稀释至3倍的体积。
2、带好橡胶手套,把要去除背景的底片放在清水里充分浸湿,以防止背景去除不均匀产生痕迹。
3、把浸湿的底片放入配好的×光片背景去除液工作液里均匀浸泡,隔一分种要把底片取出观察,根据观察底片黑度来确定是否已达到背景去除效果,如果已经达到要求,立即把底片放入清水里冲洗干净,然后烘干。
注意事项:
1、配制好的工作液一定不能放置时间太长,效果是马上使用。去除背景过程中药液由浅绿色变为无色说明药液已无效力,需重新配制。
2、一定选在明亮的地方处理,可以将药液稀释后使去除背景作用变慢,经常搅动或手拿底片两端来回运动,随时观察底片黑度,适合了立即水洗。
3、对于局部背景偏差,可以采用全部背景去除加局部逐渐拉动背景去除的方法将局部背景去除。
小鼠IL5重组蛋白库存关键词:百奥莱博,ZN1773,小鼠IL5重组蛋白
·Integrin-α4/ITGA4 mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN0751
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:hμman,rat,mouse
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.Integrin-α4/ITGA4 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到ZJ的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
Integrin-α4/ITGA4的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
小鼠IL5重组蛋白库存关键词:百奥莱博,ZN1773,小鼠IL5重组蛋白
三*化铁水溶液(10%) 100ml
NF-245 冻干羊抗人C3血清
SJ0132 羧甲基纤维素 CM-52
BL1251 100bp plus DNA Ladder
C0501 马血清(无菌过滤)
ARB13389 牛溶菌酶Lysozyme 检测服务
ARB11139 人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)酶标法分析 Human tnf α converting enzyme,tace ELISA KIT
58-22-0 Testosterone 睾酮(睾甾酮)
ARB11315 人促胰液素/胰泌素(SecretIn)检测服务 Human secretin ELISA KIT
ET106 HotMaster DNA polymerase
611-06-3 2,4-二*硝基*(代"*") 2,4-Dichloronitrobenzene
CBZ-L-脯*酸 5′-UDP,2Na 1148-11-4
ARB11559 人流行性腮腺炎(EP)酶标法分析 Human epidemic parotitis,ep ELISA KIT
玻璃纤维 N6-Benzoyladenine 65997-17-3
偶氮胭脂红G dADP,2Na 25641-18-3
BTN120698 青霉素G*盐溶 Penicillin G Sodium Solution
9032-75-1 Snailase 蜗牛酶
2,6-二甲基*酚 IPTG 576-26-1
我公司正在打折促销重组蛋白全系列产品,恭候您的咨询选购小鼠IL5重组蛋白库存。
温馨提示:不可用于临床ZL。