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名称:4×蛋白上样缓冲液(含β-巯基乙醇) 蛋白质研究
品Pai:百奥莱博
规格:10ml
产地:国产|进口
本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,β-巯基乙醇,*酚蓝,缓冲盐溶液等。 SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的*键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构;β-巯基乙醇可以断开半胱*酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构,消除了蛋白结构之间的差异。ZZ无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关;*酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用说明:
1. 请按每10μL蛋白样品加入10μL上样缓冲液的比例(2倍稀释)来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释样品。
2. 混匀后,100℃水浴加热3~5分钟,使蛋白变性。
3. 冷却到室温后,10000~14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
1. 聚丙*(代"烯")酰胺凝胶浓度为8%时*酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右;胶浓度12%时,约在20kd左右;胶浓度15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2. 本试剂因含β-巯基乙醇,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 蛋白上样缓冲液含有*酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
储存条件:2~8℃,有效期3个月
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·甲基硫*(代"脲")嘧啶
编号:QN0852
英文名称:Methyl thiouracil
规格:25g|100g
CAS号:56-04-2
·D-山梨醇
编号:QN0155
英文名称:D-Sorbitol
规格:500g|5kg
别名:山梨糖醇;D-山梨糖醇;山梨醇;清凉茶醇;花楸醇
CAS号:50-70-4
分子式:C6H14O6
分子量:182.18
储存条件:室温
纯度:≥98%
性状:白色结晶性粉末
D-山梨醇用于 生化研究;酸碱滴定硼*(代"酸");制造山梨酸、抗坏血酸和丙二醇;合成增塑剂和树脂;气相色谱固定液(ZG使用温度190℃,溶剂为甲醇加水),分离分析低沸点含氧化合物、胺类化合物、氮和氧杂环化合物。
·5×RNA Loading Buffer(非变性)
编号:QN1001
英文名称:RNA Loading Buffer,5×(Native)
规格:1ml|5ml
本品是5倍浓缩的RNA 上样缓冲液,用于RNA非变性凝胶电泳,能促使RNA样品沉入凝胶加样孔中。其主要成份为甘油,EDTA,*酚蓝和二甲*青等,经过DEPC处理,无RNase。*酚蓝和二甲*青用作电泳时的指示剂,可指示电泳进程。
储存条件:2~8℃
·热启动Taq DNA Polymerase
编号:QN0871
英文名称:Hot Start Taq DNA Polymerase
规格:500U|1000U
Hot Start Taq DNA Polymerase品是抗Taq单克隆抗体修饰的热启动Taq DNA Polymerase,高温加热前抗Taq单克隆抗体与 Taq酶结合,YZ聚合酶的活性,从而YZ低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性,因此无需特殊失活处理,在常规PCR反应条件下即可使用。在qPCR反应中,能明显提高荧光PCR的扩增效率(尤其对低拷贝数模板),改善其扩增曲线的WM度,其稳定性好、可重复性高、特异性强。此酶室温放置一周,酶活性仍可保持95%以上。
活性定义:1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:SDS-PAGE检测Taq DNA Polymerase纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
酶贮存缓冲液:20mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mM EDTA;1 mM DTT;100 mM KCl;50% glycerol;稳定剂
适用范围:用于小于6kb的对保真度要求不高的DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等,产物可以直接用于T/A载体克隆。
建议PCR条件:预变性温度是95度,时间为5-10分钟,其它的和普通Taq酶的反应条件一样。
PCR体系(以50μl反应体系为例)
Template———————————<0.5μg
上游引物(10μM)————————1μl
下游引物(10μM)————————1μl
10×Buffer(含Mg2+)——————5μl
dNTP(各2.5mM)—————————4μl
热启动Taq酶——————————0.5-1μl
ddH2O—————————————up to 50μl
储存条件:-20℃保存, 有效期至少一年
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温馨提示:不可用于临床ZL。