提供商： 吉赛生物 服务名称： circRNA干扰技术服务
RNA干扰 (RNA interference, RNAi)技术，是将与内源mRNA 编码区同源的小片段（19 －23bp）外源双链 RNA（siRNA）导入细胞中，引发细胞中相应mRNA GX特异性降解，从而导致特定基因表达沉默（knock down）的一种实验技术。吉赛生物针对circRNA的接头序列设计siRNA序列特异性敲低目的circRNA的表达。对于每条选定的siRNA靶序列，设计 siRNA 正义链和反义链，以 loop(6nt or 7nt) 相连，形成稳定的发卡RNA，即为 shRNA（short hairpin RNA），可构建shRNA质粒直接转染或通过病毒包装后转染细胞，并对转染细胞进行阳性鉴定和转代细胞株的培养，ZZ实现对特定circRNA特异性敲低的作用。
案例
针对circRNA circPAIP2进行siRNA敲低实验示意图
我们的优势
l shRNA载体转染效率高、操作简单、RNA沉默效果易于检测
l 设计circRNA divergent primers检测敲低circRNA的效率
l 特异性敲低circRNA的表达，不影响亲本线性基因的表达
| 实验名称 | 项目内容 | 周期（工作日） | 备注 |
| circRNA siRNA筛选 | siRNA设计和合成 | 15 | 含1条阴性对照及3条siRNA |
| 细胞转染（客户提供细胞） | |||
| PCR干扰效率验证 | |||
| circRNA shRNA载体构建 | 载体构建 | 20 | 1.一条shRNA质粒，2.对照shRNA质粒，3.干扰验证报告 |
| 细胞转染（客户提供细胞） | |||
| PCR干扰效率验证 | |||
| 病毒包装 | 慢病毒包装 | 20 | 过表达病毒液108 TU/ml，1ml 赠送对照病毒液 |
| 稳定细胞株构建检测 | circRNA稳定细胞株筛选 | 20 | 病毒感染后筛选，检测过表达效率 |
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