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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN70605型miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN70605型miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)厂家价格
规格:30次
英文名:miRNA Ladder
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
编号:BTN70605
尿素-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Urea-PAGE)是目前分离100nt以下的小片段RNA分子,尤其是20nt左右的microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是目前作为miRNA电泳的分子量对照产品还很少,为此百奥莱博开发了本产品。
产品特点:
1. 范围在15-50nt,尤其适合于长度在20nt左右的miRNA的分子长度初步确定。
2.产品是单链DNA,变性胶上泳动行为类似于单链的RNA,但比RNA 更稳定。
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期为一年。
使用方法:
1. 将5μL 本产品与15μl 10M的尿素溶液(自备)或5μL miRNAload电泳上样液混合后直接上样。也可以使用样品所用的其它上样液。
2.电泳后用0.5μg/mL的EB溶液染色半小时后即可在UV下观察。
使用效果:

图注: 用5μL本产品在浓度为15%的PAGE(含7M尿素)上电泳(用1×TEB缓冲液),用0.5μg/mL的EB溶液染色。
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·沉淀型TMB显色试剂盒
编号:BTN101106
英文名称:Precipitated TMB Chromogenic Kit
规格:100mL
TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方,辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物,适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学,以及原位杂交染色等。即开即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。
产品特点:
1.相对于DAB来说,灵敏度高。
2.色泽稳定,无须避光显色。
3.色带为蓝色,便于观察。
4.无毒环保,可以放心使用。
产品组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 100ml |
溶液B | 100ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。
使用方法:一、免疫印迹染色
1.准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2-5分钟,直至深蓝色沉淀出现。
4.用镊子夹起固相膜,放入去离子水中清洗。
5.空气中晾干。
6.拍照记录。
二、免疫化学染色
1.准备好含有待测蛋白的组织切片:包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3.室温下,小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
4.室温下孵育5-10分钟,或直至样本出现深蓝色。
5.小心移去切片上显色工作液。
6.室温下,小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
7.小心移去切片上的PBS缓冲液。
8.放上盖玻片或封片。
9.(选择步骤)进行甲基绿复染。
10.立即在一般光学显微镜下观察:阳性呈现深蓝色。
注意事项:1.加入1滴溶液A和1滴溶液B,可按比例增减
2.如果封闭欠佳,易造成背景颜色过深
3.固相膜显色后数小时将会褪色,不能存在。
4.该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
5.染色后可用甲基绿或苏木素复染,增强对照。
疑难解答:Q:在ELISA底物反应过程中,为何有些孔呈蓝色,而另外的孔呈蓝绿色?
A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象,不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的,建议降低二抗的浓度。
Q:ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀?
A:HRP浓度过高,建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
Q:如何降低背景读数?
A:建议降低一抗或二抗浓度,延长封闭时间。
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·Denhardt溶液(同位素探针)
编号:BTN91104A
英文名称:Denhardt Solution
规格:250mL
本产品是Z经典的、用于核酸膜杂交时降低膜对标记探针的非特异结合的试剂,早在Southern杂交出现前10年由Denhardt发明,该产品可用与Southern(含单拷贝基因)、Northern、非同位素杂交(B型规格),与硝酸纤维素膜、尼龙膜等各种常用的核酸杂交介质兼容。A和B分别适用于同位素和非同位素探针。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
·土壤微生物RNA提取试剂盒
编号:BTN90704
英文名称:Soil microbe RNA extraction kit
规格:50次
由于土壤中有机质含量丰富,尤其是其中的腐殖酸对 RT-PCR等后续反应有极大的YZ作用,所以从土壤微生物提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本试剂盒就是为解决相关问题而研发设计的。
试剂盒特点:1. 操作简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好,RNA 纯度更高,平均 OD260/280一般都在 2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
4. 性价比高于进口的土壤 RNA提取产品。
5. 试剂无毒无害,环保。
试剂盒组成: 成分 | A型 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 15ml |
溶液C | 25ml |
溶液D | 25ml |
RNA溶解液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 称取 0.1-0.5 g的土壤,加入1mL溶液A,震荡器上剧烈震荡 5-10分钟。
注意:一定要让管底的土壤震荡起来。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在 4℃ 放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇 匀后再取用。
2. 稍微静置后将上清液转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。
3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡 30秒混匀。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温 12000rpm离心 3~5分钟。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。Z好留下 100μl上清液不取。
6.在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自备*仿,用手上下颠倒或振 荡器振荡 30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
7.室温 12000rpm离心 3分钟,两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
8. 将上清液(约1mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物。
9.在上清液中加入0.5倍体积的溶液D,用手上下颠倒或振荡器振荡 30秒混匀,此时溶液呈白色浑浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
10. 13000-15000g室温离心 5-30分钟,小心移弃上清液,避免触及管底大量的白色 RNA沉淀。
11.在离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡器上振荡混均 30秒。室温离心13000-15000g 1分钟,RNA 此时在管底形成细小沉淀。小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA沉淀。
12. 重复第 11 步的75%乙醇清洗步骤一次。
13. 短暂快速离心数秒使管壁上残留液体沉到管底(约50μl),用移液枪小心吸弃,注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,因为残留的乙醇会影响后续反应。
14.室温短暂放置 2分钟,立即加入适量(一般为10-30μl)RNA 溶解液使 RNA沉淀溶解。注意:千万不要用真空离心法使 RNA沉淀过于干燥,否则 RNA 将变得十分难溶。RNA样品可以直接使用,也可以存放于-80℃长期保存。
15. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA电泳 ,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
16. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出 RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
17. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR等反应。
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