特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66~669 kD)现货在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66~669 kD)现货
规格:20次(100μl)
编号:RFT151
品Pai:百奥莱博
英文名:High Molecμlar Weight Native Electrophoresis Protein Marker
产地:国产|进口
本产品是5种高纯蛋白质干粉混合物,总蛋白含量为250μg。具体蛋白含量如下:
蛋白名称 | 分子量(kD) | 蛋白来源 | 蛋白含量(μg) |
Thyroglobμlin | 669 | porcine thyroid | 76 |
Ferritin | 440 | equine spleen | 50 |
Catalase | 232 | bovine liver | 36 |
Lactate dehydrogenase | 140 | bovine heart | 48 |
Albumin | 66 | bovine serum | 40 |
分子量范围为66kD-669kD,经过非变性电泳后,用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带。
使用说明:1. 取100μl非变性蛋白上样缓冲液(1×)加入到蛋白干粉混合物中,彻底混匀融化后,-20℃贮存。
2. 常温融化后,彻底混匀,上样电泳。
注:上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
3. 电泳结束后,染色,观察结果。
注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量,一般稀释50倍。
注意:1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE),因为在SDS存在下,含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。
2. 在非变性条件下,蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此,在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中,蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下,确定出蛋白的Rf值,绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
我公司的
高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66~669 kD)现货,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66~669 kD)现货关键词:High Molecμlar Weight Native Electrophoresis Prote,高分子量非变性电泳蛋白质Marker,66~669 kD,RFT151,高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66~669 kD)
·GX高保真DNA聚合酶
编号:RFT103
英文名称:Taq plus DNA Polymerase
规格:500U(100μl)|5×500U(5×100μl)
Taq plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成,具有扩增效率高,错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比,Taq plus DNA聚合酶具有扩增长度长,保真性好的优点;与pfu DNA聚合酶相比,具有扩增速度快,反应效率高的优点。此酶具有比Taq DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A,可以通过TA克隆法进行克隆。适用于要求保真性和GX率的PCR反应,大多数情况下可以替代Taq DNA 聚合酶。
产品组成:Taq plus DNA Polymerase(5U/μl)——————————100μl
10×Taq plus PCR buffer(含Mg2+)——————————1ml
活性定义:1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
贮存液:50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
使用方法:1、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
成分 | 体积 | 终浓度 |
Template | 0.1-1μg | as you wish |
Primer 1(10μM) | 1μl | 200nM |
Primer 2(10μM) | 1μl | 200nM |
10×Taq plus PCR buffer | 5μl | 1× |
dNTP Mixture(10 mM) | 1μl | 200μM each |
Taq plus(5 U/μl) | 0.5-1μl | 2.5-5U |
ddH2O | up to 50μl | - |
2、混匀后,离心快甩将反应液收集到管底。
3、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
4、PCR仪上执行以下程序:
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
退火 | Tm-5℃* | 30 sec |
延伸 | 72℃ | 1 min/kb |
ZH延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定ZJ的反应条件(温度、时间等)。
常见问题分析:
1、Taq plus DNA polymerase能扩增多长片段?
对简单模板(如λ噬菌体做模板),可以扩增 kb片段;对复杂模板(如基因组DNA),可以扩增 kb片段。
2、Taq plus DNA polymerase保真性怎样?
Taq plus含有3’-5’校对活性的聚合酶,有校对功能。保真性为普通Taq酶的3倍。
3、使用Taq plus DNA polymerase的扩增产物是否可以进行TA克隆?
由于使用Taq plus得到的PCR产物大多数带有A,可以进行TA克隆。
4、Taq plus DNA polymerase可以扩ZGGC含量片段吗?
Taq plus可以扩ZGGC含量片段,建议使用Taq plus配合2×GC buffer使用,而不建议使用10×Taq plus PCR buffer。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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温馨提示:不可用于临床ZL。