提供商: 柏礼生物医药 服务名称: 腺病毒载体构建与包装
腺病毒载体构建与包装
腺病毒是一种没有包膜的颗粒,其中的DNA以线性双链的形式存在。由于其具有宿主范围广、可感染分裂和非分裂细胞、高滴度制备、外源基因装载容量大等优点,已被广泛地应用于基础研究和临床试验中,并且腺病毒载体已成为世界上Z常用的基因ZL载体之一。
技术特点
病毒表达系统
腺病毒表达系统
慢病毒表达系统
病毒基因组
双链DNA病毒
RNA逆转录病毒
自主复制
不能
是否整合
病毒基因组游离于宿主基因组外,瞬时表达外源基因
病毒基因组整合于宿主基因组,长时间、稳定表达外源基因
感染细胞类型
感染绝大多数细胞,包括分裂期、非分裂期细胞。
表达丰度
高水平表达
中水平表达
表达时间
快(1-2 天)
慢(2-4 天)
滴度
滴度可达10E12pfu/mL
滴度可达10E9-10E10TU/mL
克隆容量
可插入高达8kb的外源片段,滴度随插入片段长度增加而降低
可插入不超过8kb的外源片段,滴度随插入片段长度增加而降低
免疫原性
高免疫原性
低免疫原性
RNAi
病毒进入细胞往往引起细胞内干扰素反应,一般情况下不适合做RNAi实验
适合,是RNAi实验的优选工具
基因过表达
包装容量较大,可以满足较大基因的包装,是过表达基因的优选工具
包装容量有限,过表达的基因过大时,病毒滴度受到影响
过表达microRNA
适合
适合,是过表达microRNA实验的优选工具
下调microRNA
有报道但不成熟
是否可以自行扩增
可以
需要特殊包装系统和包装环境
服务流程
1. 克隆目的基因或者合成针对目的基因的下调序列
2. 将目的基因片段构建进腺病毒穿梭载体
3. 穿梭载体与病毒骨架进行重组
4. 转染293A细胞进行病毒包装
5. 腺病毒大量扩增
6. 测定腺病毒滴度
提供产品
产品名称
病毒滴度
产品规格
赠送阴性对照病毒规格
非纯化腺病毒
>10^10 PFU/ml
1ml
1ml (>10^10 PFU/ml)
纯化腺病毒
>10^11 PFU/ml
100ul (>10^11 PFU/ml)
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