产品简介:
全长转录组研究是理解生物机体功能的一个重要途径。传统二代转录组测序无法直接获得单个RNA分子由5ˊ到3ˊ的全部序列。基于PacBio三代测序平台的转录组研究,无需片段打断,直接读取反转录的全长cDNA,能够有效获取高质量的单个RNA分子的全部序列。无需进行转录本的组装,即可准确辨别二代测序无法识别的完整的、准确的可变剪接、转录起始位点,能够有效的获取高质量的单个mRNA分子的序列信息。
产品优势:
无需组装,直接测序获得全长mRNA和lncRNA转录本;
可准确识别可变剪接形式,检测新基因和新的基因亚型;
无参考基因组情况下,解析物种特有基因或基因家族;
提高无参转录组研究的定量准确性。
测序实验流程图:

技术路线:

分析内容:
测序Reads质量质控(QV);
测序Reads聚类;
转录本全长评估;
基因结构优化;
新转录本的预测;
转录本功能注释;
基因融合分析;
可变剪接鉴定;
等位基因分析(基于同一样本的二代数据);
非编码RNA及其靶基因预测;
SSR分析;
SNP分析(基于同一样本的二代数据);
CDS预测;
样品要求:
1. 样品类型:总RNA;
2. 样品浓度:≥300 ng/ul;
3. 样品总量:≥1ug;
4. 样品纯度:OD260/280为1.8~2.2,OD260/230≥1.0,260nm处有正常峰值;无基因组DNA污染;
5. RNA完整性:电泳检测28S/18S≥1.5。(据送样日最近的电泳结果)